Үндсэн ялгаа – HPLC ба LCMS
HPLC болон LCMS-ийн ялгааг шинжлэхийн өмнө эхлээд HPLC болон LCMS-ийн утгыг харцгаая. Хроматографи нь хроматографийн орчинд дамжих явцад дээжийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгадаг химийн шинжилгээнд ялгах арга юм. Энэ нь мөн дээж, суурин фаз, хөдөлгөөнт үе шаттай харилцан үйлчлэлцдэг. HPLC гэдэг нь өндөр үзүүлэлттэй шингэний хроматографийн товчлол бөгөөд аналитик химийн шинжлэх ухаанд шингэн хроматографийн арга болгон ашигладаг. Шингэн хроматографи ба масс спектроскопийн (LCMS) хослолыг сонгосон биомолекулуудын тоон шинжилгээнд зориулж бүтээсэн бөгөөд HPLC-тэй харьцуулахад өндөр мэдрэмжтэй, үнэн зөв, өвөрмөц шинжилгээний процедур юм. Энэ бол HPLC ба LCMC хоёрын гол ялгаа юм. Энэ нийтлэл нь танд химийн шинжилгээ хийдэг HPLC болон LCMC-ийг танилцуулж, HPLC болон LCMS-ийн ялгааг хэлэлцэх болно.
HPLC гэж юу вэ?
Өндөр хүчин чадалтай шингэн хроматографи (HPLC) нь аналитик химийн салбарт түгээмэл ялгах арга юм. Энэ нь голчлон бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг салгах, хольц дахь бүрэлдэхүүн хэсэг бүрийг тодорхойлох, тоо хэмжээг тодорхойлоход хэрэглэгддэг. Өмнө нь энэ аргыг өндөр даралтын шингэний хроматографи гэж нэрлэдэг байсан, учир нь энэ нь дээжийн хольцыг агуулсан даралтат шингэн уусгагчийг хатуу шингээгч материалаар дүүргэсэн баганаар урсгах насосуудаас хамаардаг байв. Дээжний хольцын бүрэлдэхүүн хэсэг бүр нь хатуу шингээгч материалтай харилцан адилгүй харилцан үйлчилдэг бөгөөд энэ нь өөр өөр бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн урсгалын хурдыг өөр өөр болгодог. Энэ нь HPLC баганаас урсаж байгаа бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг салгахад хүргэж болзошгүй.
HPLC-ийг цусан дахь Д аминдэмийн хэмжээг шинжлэх, тамирчдын шээсэнд хар тамхины үлдэгдлийг илрүүлэх замаар хууль бусаар мансууруулах бодис хэрэглэх, биологийн цогц дээжийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялган салгах, судалгаа шинжилгээ хийх зэрэг олон төрлийн хэрэглээнд ашигладаг. болон эмийн үйлдвэрлэл.
LCMS гэж юу вэ?
Шингэн хроматографи-масс спектрометр (LCMS) нь шингэн хроматографийн физик салгах чадварыг масс спектрометрийн (MS) массын шинжилгээний чадваруудтай хослуулсан аналитик арга юм. Шингэн хроматографи нь салгах арга бөгөөд масс спектрометрийг цэнэгтэй бөөмсийн масс ба цэнэгийн харьцааг шинжлэхэд ашигладаг. Физик тусгаарлалтыг ихэвчлэн HPLC ба өөр HPLC-MS гэж нэрлэдэг LCMS-ээр хийдэг. LCMS нь HPLC-тэй харьцуулахад маш өндөр нарийвчлал, мэдрэмж, өвөрмөц шинж чанартай давамгайлсан аналитик арга юм. Тиймээс энэ нь судалгааны зорилго, эмийн шинжилгээ, хүнсний шинжилгээ гэх мэт олон хэрэглээнд тустай. LCMS нь ихэвчлэн нарийн төвөгтэй химийн хольц байгаа тохиолдолд тодорхой дээжийн биохимийн шинж чанарыг ялгах, илрүүлэх, тодорхойлох, тоон үзүүлэлтийг тодорхойлоход ашиглагддаг.
HPLC болон LCMC хоёрын ялгаа нь юу вэ?
HPLC болон LCMC-н товчлол ба тодорхойлолт
HPLC: HPLC нь Өндөр гүйцэтгэлтэй шингэн хроматографийн товчлол юм. Энэ нь хольц дахь бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгах, тодорхойлох, тоо хэмжээг тодорхойлоход голчлон ашигладаг салгах арга юм.
LCMS: LCMS нь Шингэн хроматографи ба Масс спектрометрийн товчлол юм. Энэ нь шингэн хроматографийн физик салгах чадварыг масс спектрометрийн (MS) массын шинжилгээний чадваруудтай хослуулсан аналитик арга юм.
HPLC болон LCMC-ийн шинж чанарууд
Ангилал
HPLC: Энэ нь зөвхөн шингэн хроматографийн арга юм.
LCMS: Энэ нь Шингэн хроматографийн арга ба Масс спектрометрийн аргын хослол юм.
Үр ашиг
HPLC: LCMS-тэй харьцуулахад HPLC шинжилгээ нь үр ашиг багатай бөгөөд удаан байдаг.
LCMS: HPLC-тэй харьцуулахад LCMS шинжилгээ нь илүү үр дүнтэй бөгөөд хурдан байдаг.
Мэдрэмж
HPLC: LCMS-тэй харьцуулахад HPLC шинжилгээ нь мэдрэмж багатай.
LCMS: HPLC-тэй харьцуулахад LCMS шинжилгээ нь илүү мэдрэмтгий байдаг.
Онцгой байдал
HPLC: LCMS-тэй харьцуулахад HPLC-ийн шинжилгээ нь тодорхой бус байна.
LCMS: HPLC-тэй харьцуулахад LCMS шинжилгээ нь илүү тодорхой юм.
Нарийвчлал
HPLC: HPLC нь зарим химийн бодисыг тодорхойлох LCMS-ээс бага нарийвчлалтай үр дүн өгдөг.
LCMS: LCMS нь зарим химийн бодисыг тодорхойлоход HPLC-ээс илүү нарийвчлалтай үр дүнг өгдөг.
Бүрэлдэхүүн хэсэг
HPLC: HPLC-ийг LCMS-ийн бүрэлдэхүүн хэсэг гэж үзэж болно.
LCMS: LCMS-ийг HPLC-ийн бүрэлдэхүүн хэсэг гэж үзэх боломжгүй.
Ионы эх үүсвэр
HPLC: HPLC хэрэгсэлд ионы эх үүсвэр байхгүй.
LCMS: Ионы эх үүсвэр нь LCMS хэрэгсэлд байдаг.
Програмууд
HPLC: Ионууд, полимерууд, органик молекулууд болон биомолекулуудыг HPLC ашиглан шинжлэх боломжтой.
LCMS: Органик молекулууд болон биомолекулуудыг шинжлэх боломжтой. HPLC-ээс ялгаатай нь LCMS-ийг бүрэн шийдэгдээгүй хольцыг шалгахад ашиглаж болно.
Үйл ажиллагаа
HPLC: HPLC хэрэгслийн диаграммыг 1-р зурагт өгсөн бөгөөд үүнд ихэвчлэн автомат сорьц, насос, илрүүлэгч орно. Дээж авагч нь дээжийн хольцыг хөдөлгөөнт үе шатанд (ус, ацетонитрил ба/эсвэл метанол зэрэг уусгагчийн даралтат хольц) оруулж, баганад шилжүүлдэг. Шахуургууд нь баганаар дамжуулан хөдөлгөөнт фазын хүссэн урсгал, найрлагыг хүргэдэг. Багана нь цахиур эсвэл полимер гэх мэт мөхлөгт хатуу тоосонцор болох шингээгчээр дүүрсэн байна. Детектор нь баганад байгаа дээжийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн хэмжээтэй пропорциональ дохио үүсгэдэг тул сонгосон дээжийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн тоон шинжилгээг хийх боломжийг олгодог. HPLC багажийг хянаж, тоон микропроцессор болон хэрэглэгчийн программ хангамжаар өгөгдлийн шинжилгээ хийдэг.
Зураг 1: HPLC хэрэгслийн диаграм
LCMS: LCMS хэрэгслийн диаграммыг 2-р зурагт үзүүлэв. Дээжийн хандыг HPLC-ээс бүрдэх баганад оруулна. Энэ баганад физик шинж чанарт үндэслэн дээжийн метаболитуудыг хадгалдаг бөгөөд өөр өөр метаболитууд нь өөр өөр хугацааны интервалаар масс спектрометр рүү урсдаг. Масс спектроскопи нь бөөмсийн массыг үнэлэх, молекулын элементийн зохион байгуулалтыг тодорхойлох, молекулын бүтцийг тодруулахад ашиглагддаг. Гэсэн хэдий ч масс ба цэнэгийн харьцааг тодорхойлохын тулд дээжийг цэнэглэгдсэн молекулуудыг үүсгэхийн тулд ионжуулсан байх ёстой. Тиймээс HPLC хэрэгслийн оронд LCMS нь төмрийн эх үүсвэр, массын анализатор, детектор зэрэг нэмэлт гурван модулиас бүрддэг. Ионы эх үүсвэр нь хийн фазын дээжийг ион болгон хувиргах боломжтой ба масс анализатор нь цахилгаан соронзон орон ашиглан ионуудыг массаар нь бүлэглэдэг. Эцэст нь детектор нь утгыг хэмжиж, дээжинд байгаа ион бүрийн өгөгдлийг өгдөг. LCMS техникийг чанарын болон тоон хэрэглээний аль алинд нь ашиглаж болно.
Зураг 2: LCMS хэрэгслийн диаграм
Эцэст нь хэлэхэд HPLC нь шингэн хроматографийн арга бол LCMS нь шингэн хроматографи болон масс спектрометрийн хослол юм. Эдгээр шинжилгээний аргууд хоёулаа өөр өөр шинж чанартай боловч хүнсний найрлага, эм бэлдмэл болон бусад биоидэвхтэй молекулуудыг тодорхойлох, хэмжихэд ашиглаж болно.
