Үндсэн ялгаа – In situ эрлийзжилт ба иммуногистохими
Хорт хавдар, халдварт өвчний оношлогоо нь хавдар эсвэл халдварт эсүүд, түүний тархалт, эсийн хөгжлийн байршлыг тодорхойлох, ихэнх халдварт болон халдварт өвчний генетикийн үндэслэлд дүн шинжилгээ хийх зорилгоор шинэ протеомик ба геномикийн аргуудыг ашигладаг түгээмэл чиг хандлага юм. халдварт бус өвчин. Үүний үр дүнд эмийг нарийн боловсруулж, боловсруулж, өвчинд тохирсон эмчилгээ хийх боломжтой болно. In situ эрлийзжүүлэх (ISH) ба Immunohistochemistry (IHC) нь хорт хавдрын биологид өргөн хэрэглэгддэг хоёр арга бөгөөд in situ эрлийзжүүлэлт ба иммунохими хоёрын гол ялгаа нь шинжилгээний процедурт ашигладаг молекулуудад оршдог. ISH-д нуклейн хүчлийн датчикийг шинжилгээнд ашигладаг бол IHC-д моноклон ба поликлональ эсрэгбиемүүдийг оношилгоонд ашигладаг.
In Situ Hybridization (ISH) гэж юу вэ?
In situ эрлийзжүүлэх нь нуклейн хүчлийг эрлийзжүүлэх арга бөгөөд эд эсийн хэсэг эсвэл хэсэг, бүхэл эд эс эсвэл эсэд шууд хийгддэг. Энэхүү техник нь Уотсон Крикийн нэмэлт суурь хосолсон онолоос хамаардаг бөгөөд үүний үр дүнд мутацид орсон генийг илрүүлэх эсвэл шаардлагатай генийг тодорхойлох боломжтой ДНХ-ДНХ-ийн эрлийз эсвэл ДНХ-РНХ-ийн эрлийз үүсдэг. Нэг судалтай ДНХ-ийн дараалал, хоёр хэлхээтэй ДНХ-ийн дараалал, нэг судалтай РНХ-ийн дараалал эсвэл синтетик олигонуклеотидын дарааллыг эрлийзжүүлэх аргачлалын явцад датчик болгон ашигладаг бөгөөд эдгээр датчикуудыг 5' төгсгөлд цацраг идэвхт фосфороор тэмдэглэсэн байдаг.. Ашигласан датчикийн төрөл болон дагаж мөрдөж буй дүрслэх техникийн төрлөөс хамааран өөр өөр төрлийн ISH техникүүд байдаг.
Зураг 01: Флюросентийг газар дээр нь гибридизаци
ISH-ийг голчлон халдварт өвчний молекулын оношлогоонд эмгэг төрүүлэгч байгаа эсэхийг тодорхойлох, молекулын оношилгоогоор дамжуулан эмгэг төрүүлэгчийг баталгаажуулах зорилгоор олон төрлийн хэрэглээ байдаг. Түүнчлэн хөгжлийн биологи, кариотип, филогенетик шинжилгээ, хромосомын физик зураглал зэрэгт ашигладаг.
Иммуногистохими (IHC) гэж юу вэ?
IHC-ийн техникт шинжилгээнд хамрагдсан гол молекул нь эсрэгтөрөгч юм. IHC-ийн үед моноклон ба поликлональ эсрэгбие нь халдвар эсвэл хорт эсийн өсөлтийн төлөв байдлын үед эсрэгтөрөгч байгаа эсэхийг тодорхойлоход ашиглагддаг. Энэ техник нь эсрэгтөрөгч-эсрэгбие холбоход үндэслэсэн бөгөөд энэ техникт ферментийн шошгыг ашигладаг; Ийм хэрэглээний нэг нь ELISA (Ферменттэй холбоотой дархлааны шинжилгээ) юм. Тэмдэглэгээ нь мөн флюресценттэй эсрэгбие эсвэл радио шошготой эсрэгбие байж болно.
Зураг 02: Иммуногистохими
IHC нь хорт хавдрын эсийг илрүүлэхэд өргөн хэрэглэгддэг. Оношилгооны процедур нь хавдрын эсэд агуулагдах эсрэгтөрөгчийг тодорхойлох, хавдрыг тодорхойлоход чиглэгддэг. Халдвар үүсгэгчийг оношлоход ижил процедурыг оруулсан болно. Моноклон ба поликлональ эсрэгбие нь хүссэн уураг болон нийлэг эсрэгбиеийн хооронд эсрэгбие-эсрэгтөрөгчийг холбох урвалыг идэвхжүүлснээр өөр өөр генийн бүтээгдэхүүнийг шинжлэхэд ашигладаг.
In situ эрлийзжүүлэлт ба иммуногистохимийн хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- ISH болон IHC нь маш өвөрмөц урвал юм.
- Хоёр техник нь өндөр нарийвчлалтай.
- Хоёр аргыг хорт хавдар болон халдварт өвчнийг оношлоход ашиглаж болно.
- Эдгээр техникийг ариутгасан in vitro орчинд гүйцэтгэдэг.
- Хоёулаа хурдан давтагдахуйц үр дүнг өгдөг техник юм.
- ISH болон IHC нь радио шошго, флюресценцийн техник зэрэг илрүүлэх аргуудыг ашигладаг.
In situ эрлийзжүүлэлт ба иммуногистохими хоёрын ялгаа юу вэ?
In Situ эрлийзжилт ба иммуногистохими |
|
| ISH нь нуклейн хүчлийн эрлийзжүүлэх арга бөгөөд эд эсийн хэсэг, хэсэг эсвэл бүхэлд нь эдэд шууд хийгддэг. | IHC нь эсийн гадаргуу дээр байрлуулсан тусгай уургийн маркер болох антиген байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд моноклон болон поликлональ эсрэгбие ашигладаг арга юм. |
| Шинжилсэн био молекулын төрөл | |
| ISH нуклейн хүчлийг шинжилдэг. | IHC уураг-эсрэгтөрөгчийг шинжилдэг. |
| Биохимийн урвалын үндэс | |
| ДНХ-ДНХ эсвэл ДНХ-РНХ-ийн хооронд нэмэлт суурь хосолдог. | Антиген-эсрэгбиеийн харилцан үйлчлэл нь иммуногистохимид оролцдог. |
| Ферменттэй холбоотой илрүүлэх аргууд | |
| Ферменттэй холбоотой илрүүлэх аргыг ISH-д ашиглах боломжгүй. | Ферменттэй холбоотой илрүүлэх аргуудыг IHC-д ашиглаж болно. |
Хураангуй – In situ эрлийзжилт ба иммуногистохими
Молекулын оношлогоо нь хорт хавдар, халдварт өвчин, ХДХВ, сүрьеэ зэрэг халдварт бус өвчнийг эсэд агуулагдах молекулын маркерууд дээр үндэслэн оношлоход ашиглаж болох хурдан бөгөөд баталгаажуулах арга юм.. Молекулын маркерууд нь тодорхой уургийн хэлбэрээр эсвэл генетикийн түвшинд байж болно, үүнд үндэслэн үр ашгийг нэмэгдүүлэхийн тулд янз бүрийн шинэ техникийг нэвтрүүлсэн бөгөөд эдгээр техник нь өндөр өртөгтэй боловч хөдөлмөр багатай байдаг. Тиймээс ISH нь ДНХ-ДНХ эсвэл ДНХ-РНХ-ийн эрлийз үүсэхээс хамаардаг ба IHC нь эсрэгбие ба эсрэгтөрөгчийн хоорондох өвөрмөц урвалаас хамаардаг. Энэ нь in situ эрлийзжүүлэлтийн ялгаа юм.
In Situ Hybridization ба Immunohistochemistry-ийн PDF хувилбарыг татаж авах
Та энэ нийтлэлийн PDF хувилбарыг татаж аваад офлайн зорилгоор ашиглах боломжтой. In Situ Hybridization болон Immunohistochemistry хоорондын ялгааг PDF хувилбарыг эндээс татаж авна уу.
