Гол ялгаа – Иммунофлуоресцент ба иммуногистохими
Молекул биологийн аргуудыг ашигладаг өвчний оношилгоо нь эмнэлзүйн лабораторийн технологийн хөгжиж буй салбар болжээ. Энэ нь тухайн организмын ДНХ, РНХ, эсхүл ялгарсан уурагт шинжилгээ хийх замаар өвчнийг тодорхойлох, өвчний шалтгааныг ойлгох бүх шинжилгээ, аргуудыг багтаасан болно. Молекулын оношлогооны хурдацтай дэвшил нь халдварт болон халдварт бус өвчний суурь судалгааг хийх боломжийг олгосон. Эдгээрийг өвчинд оролцдог чухал ген эсвэл уураг дахь дараалал эсвэл илэрхийллийн түвшний өөрчлөлтийг тодорхойлоход ашигладаг. Immunofluorescence (IF) ба Immunohistochemistry (IHC) нь хорт хавдрын биологид өргөн хэрэглэгддэг хоёр арга юм. IF нь IHC-ийн нэг төрөл бөгөөд флюресценц илрүүлэх аргыг моноклон ба поликлональ эсрэгбиемүүдийг шинжлэхэд ашигладаг бол IHC нь моноклон болон поликлональ эсрэгбиемийг илрүүлэх химийн аргуудыг ашигладаг. Энэ бол IF болон IHC хоёрын гол ялгаа юм.
Immunfluorescence (IF) гэж юу вэ?
Immunfluorescence нь шинжилгээнд ашигласан эсрэгбиемүүдийг илрүүлэх зорилгоор флюресцент будагч бодис эсвэл флюресцент уураг ашиглан шошголодог илрүүлэх арга юм. Шошготой хоёрдогч эсрэгбие нь хүсээгүй дэвсгэр дохиог үүсгэдэг; Иймээс IF техник нь илрүүлэх явцад хүсээгүй дохионоос зайлсхийхийн тулд үндсэн эсрэгбиемийг өөрөө шошголоход суурилдаг. Энэ аргын тусламжтайгаар анхдагч ба хоёрдогч эсрэгбиеийн хооронд өвөрмөц бус холболт үүсэхээс сэргийлж, хоёрдогч инкубацийн үе шат байхгүй тул илүү хурдан байдаг. Өгөгдлийн чанар мөн сайжирсан.
Зураг 01: BrdU, NeuN, GFAP-ийн давхар иммунофлуоресценц будалт
Флюрохром эсвэл флюресцент будагч бодисууд нь цацрагийг шингээх чадвартай нэгдлүүд юм. Бөөмүүд нь өдөөгдсөн төлөвөөс үндсэн төлөвт хүрэх үед тэдгээр нь цацрагийг ялгаруулж, детектороор барьж, спектр үүсгэдэг. Флюресцент шошго нь тодорхой урвалд нийцэж, тогтвортой байх нь маш чухал бөгөөд үнэн зөв үр дүнд хүрэхийн тулд эсрэгбиетэй зөв уялдуулсан байх ёстой. Хамгийн их хэрэглэгддэг флюрохромуудын нэг бол ногоон өнгөтэй, шингээлтийн болон ялгаралтын оргил долгионы урт нь 490 нм ба 520 нм бүхий флуоресцеин изотиоцианат (FITC) юм. IF-д хэрэглэгддэг өөр нэг бодис нь rhodamine нь улаан өнгөтэй бөгөөд 553 нм ба 627 нм шингээх болон ялгаруулах оргил долгионы урттай.
Иммуногистохими (IHC) гэж юу вэ?
IHC нь зорилтот эсэд эсрэгтөрөгч байгаа эсэхийг тодорхойлох, баталгаажуулах зорилгоор хийдэг молекулын шинжилгээний арга юм. Зорилтот эс нь халдварт тоосонцор, бичил биетний эмгэг төрүүлэгч эсвэл хорт хавдрын эс байж болно. IHC нь зорилтот эсийн эсийн гадаргуу дээр байгаа эсрэгтөрөгч байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд моноклон ба поликлональ эсрэгбиемүүдийг ашигладаг. Энэ техник нь эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн холболт дээр суурилдаг. Тодорхой эсрэгтөрөгч байгаа эсэхийг илрүүлэхийн тулд илрүүлэгч маркерыг эдгээр эсрэгбиемүүдтэй холбодог. Эдгээр маркерууд нь фермент, флюресцентээр тэмдэглэгдсэн эсрэгбие эсвэл радио шошготой эсрэгбие зэрэг химийн маркер байж болно.
Зураг 02: Immunohistochemistry-ээр будсан хулгана-тархины зүсмэл
IHC-ийн хамгийн түгээмэл хэрэглээ бол хорт хавдрын эсийн биологид хорт хавдар байгаа эсэхийг тодорхойлоход ашигладаг боловч халдварт өвчнийг илрүүлэхэд ашигладаг.
Иммунофлуоресценц болон иммуногистохимийн хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- Иммунофлуоресценц ба иммуногистохими нь in vitro нөхцөлд явагддаг.
- Хоёр техник нь эсрэгтөрөгч-эсрэгбие дээр суурилдаг
- Хоёулаа маш хурдан техник.
- Техникийн үр дүнг дахин гаргах боломжтой.
- Хоёулаа өгөгдлийн чанарыг сайжруулсан.
- Эдгээр аргуудыг хорт хавдар болон халдварт өвчнийг оношлоход ашигладаг.
Иммунофлуоресцент ба иммуногистохими хоёрын ялгаа юу вэ?
Immunfluorescence vs Immunohistochemistery |
|
| IF нь шинжилгээнд ашигласан эсрэгбиемүүдийг илрүүлэхийн тулд флюресцент будаг эсвэл флюресцент уураг ашиглан шошголодог илрүүлэх арга юм. | IHC нь шинжилгээнд ашигласан эсрэгбиемүүдийг илрүүлэхийн тулд химийн бодис эсвэл цацраг идэвхт элемент ашиглан шошголодог илрүүлэх арга юм. |
| Нарийвчлал | |
| IHC-тэй харьцуулахад IF техник дээр нарийвчлал өндөр байна. | IHC-д нарийвчлал бага байна. |
| Онцгой байдал | |
| Хэрэв илүү тодорхой бол. | IHC арай тодорхойгүй. |
Хураангуй – Иммунофлуоресцент ба иммуногистохими
Молекулын механизмууд нь анагаах ухааны салбарт олон өөрчлөлтийг авчирч, молекулын шинжилгээний дэвшилтэт аргуудыг бий болгож, оношлогооны салбарт хувьсгал хийсэн. Эдгээр шинэ бүтээлүүд нь өвчнийг хурдан бөгөөд үнэн зөв тодорхойлж, баталгаажуулахад хүргэсэн бөгөөд ингэснээр эмийг амжилттай удирдах, үйлдвэрлэх боломжийг олгосон. Эдгээр аргуудыг эмийн зорилгоо олох, эмийн бодисын солилцооны явцад эмийн фармакокинетик шинж чанарыг батлах зорилгоор фармакологид ашигладаг. IF ба IHC нь эсрэгтөрөгч ба эсрэгбие холбох үзэл баримтлал дээр суурилдаг оношлогооны хоёр арга боловч илрүүлэх арга нь хоёуланд нь ялгаатай байдаг. IF нь эсрэгтөрөгчийг илрүүлэхийн тулд флюресценцийн зарчмыг ашигладаг бол IHC нь эсрэгтөрөгчийг илрүүлэхийн тулд химийн нэгдэл гэсэн ойлголтыг ашигладаг. Энэ бол IF болон IHC хоёрын ялгаа юм.
Immunofluorescence ба Immunohistochemistry-ийн PDF хувилбарыг татаж авах
Та энэ нийтлэлийн PDF хувилбарыг татаж аваад офлайн зорилгоор ашиглах боломжтой. Иммунофлуоресценц ба иммуногистохимийн ялгааг эндээс PDF хувилбараар татаж авна уу.
