Электропораци ба бичил тарилга хоёрын гол ялгаа нь электропораци нь ДНХ-ийг эзэн эсэд дамжуулах өндөр хүчдэлийн цахилгаан импульс ашигладаг, харин бичил тарилга нь нарийн үзүүртэй шилэн зүү эсвэл микропипетк ашиглан ДНХ-г дамжуулах арга юм. хост эсүүд.
Өөрчлөлт гэдэг нь гадны ДНХ-г эзэн эс рүү шилжүүлэх үйл явц юм. Өөрчлөлтийн замаар организмын генетикийн бүтцийг өөрчлөх боломжтой. Химийн, биологийн, физикийн хувирлын янз бүрийн аргууд байдаг. Зарим нь шууд аргууд байдаг бол зарим нь шууд бус аргууд байдаг. Электропораци ба бичил тарилга нь шууд хувиргах хоёр физик арга юм. Электропораци нь ДНХ-ийг эзэн эсэд оруулахын тулд биологийн эсийн мембран дахь микроскопийн нүхийг өдөөх цахилгаан талбарыг ашигладаг. Харин бичил тарилга нь микропипетк эсвэл нарийн үзүүртэй шилэн зүү ашиглан ДНХ-г шууд дамжуулдаг.
Электропораци гэж юу вэ?
Электропораци нь ДНХ-ийг ургамлын эс болон протопласт болгон хувиргах арга юм. Энэ техник нь өндөр хүчдэлийн цахилгаан импульсийг ашигладаг. Ургамлын материалыг ДНХ агуулсан буфер уусмалд өсгөвөрлөнө. Дараа нь уусмал нь өндөр хүчдэлийн цахилгаан импульсийн нөлөөнд автдаг. Ургамлын эсийн мембранд өндөр хүчдэлийн өдөөгдсөн нүх сүв үүсдэг бөгөөд эдгээр нүхээр дамжин ДНХ нь эс дотор шилжиж, ургамлын геномын ДНХ-тэй нэгддэг. Энэ аргын үр ашиг нь ургамлын материал болон эмчилгээний нөхцлөөс хамаарна.
Зураг 01: Цахилгаан задрал
Электропорацийг ашиглан хувиргах үед эсийн зөвхөн 40-50% нь ДНХ хүлээн авдаг. Түүнээс гадна энэ аргын дагуу өөрчлөгдсөн эсийн зөвхөн 50% нь амьд үлдэж чадна. Гэхдээ энэ аргыг гүйцэтгэхэд хялбар бөгөөд эсийн биологийн бүтэц, үйл ажиллагааг өөрчилдөггүй. Үүнээс гадна үүнийг олон төрлийн эсүүдэд ашиглаж болно.
Бичил тарилга гэж юу вэ?
Бичил тарилга нь том эсүүдэд ДНХ нэвтрүүлэхэд онцгой ач холбогдолтой хувиргах арга юм. Энэ арга нь нарийн үзүүртэй шилэн зүү эсвэл микропипеткийг ашиглан ДНХ-ийг ургамлын протопласт эсвэл амьтны эсэд (өөоцит, өндөг, үр хөврөл) дамжуулдаг. Уг нь энэ арга нь хулгана зэрэг трансген амьтдыг хийхэд илүү тохиромжтой. Энэ аргын хувьд ДНХ нь цөм эсвэл цитоплазмд шууд ордог.
Электропорацийн нэгэн адил бичил тарилга нь шууд хувиргах арга юм. Бичил тарилга нь тусгай микроскопоор хийгддэг. Пипетк, зүү, микроскопын тайз, видео бичлэгийн технологи зэргийг компьютержүүлсэн хяналт нь энэ аргын үр нөлөөг нэмэгдүүлсэн. ДНХ-г тарихдаа хувиргасан эсийг хялбархан тодорхойлохын тулд будагч бодис хэрэглэж болно. Тиймээс хувирсан эсийг тодорхойлох тусдаа арга хэрэглэх шаардлагагүй. Хамгийн чухал нь бичил тарилгын процедурт маркер ген шаардлагагүй.
Зураг 02: Бичил тарилга
Түүгээр ч барахгүй энэ арга нь маш үр дүнтэй бөгөөд дахин давтагдах боломжтой. Гэсэн хэдий ч энэ арга нь зардал ихтэй, цаг хугацаа их шаарддаг бөгөөд ур чадвар шаарддаг. Мөн энэ аргаар зөвхөн цөөн тооны эсийг эмчлэх боломжтой.
Цахилгаан сийрэгжилт ба бичил тарилга хоёрын ижил төстэй зүйл юу вэ?
- Электропораци болон бичил тарилга нь хоёр төрлийн хувиргах арга юм.
- Эдгээр аргууд нь ДНХ-г ургамлын эс болон протопластуудад хүргэдэг.
- Тэдгээр нь шууд аргууд.
- Түүнээс гадна эдгээр нь физик эсвэл механик аргууд юм.
- Энэ хоёр арга нь Трансген ургамал, амьтан үйлдвэрлэхэд тустай.
Цахилгаан сийрэгжилт ба бичил тарилга хоёрын ялгаа юу вэ?
Электропорацийн техник нь ДНХ-г нэвтрүүлэхэд цахилгаан талбар ашигладаг бол бичил тарилга хийх арга нь ДНХ нэвтрүүлэхэд микропипетк эсвэл нарийн үзүүртэй шилэн зүү юм. Тиймээс энэ нь электропораци ба бичил тарилга хоёрын гол ялгаа юм. Түүнээс гадна электропорацийг ихэвчлэн ургамлын эс, протопласуудад ашигладаг бол микро тарилгыг ихэвчлэн амьтны эсэд ашигладаг. Үүнээс гадна, электропораци нь бичил тарилгатай адил цаг хугацаа шаарддаггүй.
Доорх инфографик нь электропораци болон бичил тарилгын хоорондох ялгааг хүснэгт хэлбэрээр нэгтгэн харуулав.
Хураангуй – Электропорация ба бичил тарилга
Электропораци ба бичил тарилга нь ген шилжүүлэх физик хоёр арга юм. Электропораци нь өндөр хүчдэлийн цахилгаан талбарыг ашигладаг бол бичил тарилга нь шилэн зүү эсвэл микропипеткийг ашигладаг. Тиймээс энэ нь электропораци ба бичил тарилга хоёрын гол ялгаа юм. Гэсэн хэдий ч хоёр арга хоёулаа экзоген ДНХ-ийг эзэн эсэд шууд нэвтрүүлдэг.