Исократ болон градиент шүүрлийн хоорондох гол ялгаа нь изократ элюци нь хөдөлгөөнт фаз дахь концентрацийг тогтмол байлгахыг хэлдэг бол градиент элюц нь хөдөлгөөнт үе шатанд янз бүрийн концентрацийг хадгалахыг хэлнэ.
Хроматографид изократ болон градиент элюц гэсэн нэр томъёог ашигладаг. Хроматографийн гүйлтийн үед бид хөдөлгөөнгүй фаз болох хөдөлгөөнгүй фазыг хөдөлгөөнт фазтай хамт ашигладаг. Изократ болон градиент элюци нь хөдөлгөөнт фазын шинж чанарыг тодорхойлдог.
Изократик Элюци гэж юу вэ?
Исократын элюц нь хөдөлгөөнт фаз нь тогтмол концентрацтай үед хроматографид хэрэглэгддэг нэр томъёо юм. Энд хөдөлгөөнт фазын концентраци нь хроматографийн процессын туршид тогтмол байдаг. Энэ процесст бид хроматограмм дахь хадгалах хугацаатай уялдан нэмэгдэж буй оргилын өргөнийг ажиглаж болно. Гэсэн хэдий ч энэ нь сул тал руу хөтөлдөг - хожуу шүүрлийн оргилууд нь маш хавтгай, өргөн болдог. Тиймээс эдгээр өргөн оргилуудыг оргил гэж хүлээн зөвшөөрөхөд хэцүү болдог.
Түүгээр ч зогсохгүй изократ шүүрлийн үед баганын хэмжээнээс хамаарч сонгомол чанар өөрчлөгддөггүй. Энэ нь сонгох чадвар нь баганын хэмжээсийн өөрчлөлтөөс хамаарахгүй гэсэн үг юм. Энд урт ба диаметрийг баганын хэмжээс гэж үзнэ. Тиймээс оргилууд ижил дарааллаар ялгардаг.
Градиент Элюци гэж юу вэ?
Градиент элюци нь энд хөдөлгөөнт фаз нь янз бүрийн концентрацтай үед хроматографид хэрэглэгддэг нэр томъёо юм. Өөрөөр хэлбэл хөдөлгөөнт фазын концентраци тогтмол байх албагүй. Жишээлбэл, HPLC-д ялгах нийтлэг арга нь метанолын 10% -ийг анх хэрэглэж, концентрацийг аажмаар нэмэгдүүлэх замаар 90% -д төгсдөг. Хөдөлгөөнт үе нь сул уусгагч ба хүчтэй уусгагч гэсэн хоёр бүрэлдэхүүн хэсэгтэй. Сул уусгагч нь ууссан бодисыг аажмаар шингэлэх боломжийг олгодог бол хүчтэй уусгагч нь ууссан бодисыг хурдан ялгаруулдаг. Урвуу фазын хроматографийн хувьд бид усыг сул уусгагч, органик уусгагчийг хүчтэй уусгагч болгон ашигладаг.
Зураг 01: HPLC
Түүгээр ч зогсохгүй градиент элюцийн арга нь дараа нь ялгаруулж буй бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг багасгаж, хурдан ялгаруулж, хроматограммд нарийн оргилыг өгдөг. Энэ арга нь оргил хэлбэр, оргил өндрийг мөн сайжруулдаг. Цаашилбал, градиент элюцийн техникт баганын хэмжээсийн өөрчлөлтийг дагаад шүүрэлтийн дараалал өөрчлөгддөг.
Изократ болон градиент элюци хоёрын ялгаа юу вэ?
Хроматографид изократ болон градиент элюц гэсэн нэр томъёог ашигладаг. Изократик ба градиент элюци нь хөдөлгөөнт фазын шинж чанарыг тодорхойлдог. Изократ болон градиент элюцийн гол ялгаа нь изократ элюци нь хөдөлгөөнт фаз дахь тогтмол концентрацийг хадгалахыг хэлдэг бол градиент элюц нь хөдөлгөөнт фазын янз бүрийн концентрацийг хадгалахыг хэлнэ.
Изократик шүүрлийн техникт оргилын өргөн нь хадгалах хугацаа нь шугаман байдлаар нэмэгддэг. Гэсэн хэдий ч градиент элюцийн техникт дараа нь ялгарах бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн хадгалалт багасч, элюц нь илүү хурдан болж, нарийхан оргилуудыг өгдөг. Үүнээс гадна изократ элюцийн үед сонгомол чанар нь баганын хэмжээсээс хамаардаггүй, харин градиент элюцийн үед баганын хэмжээ өөрчлөгдөхөд сонгомол байдал өөрчлөгддөг.
Дараах хүснэгтэд изократик болон градиент элюцийн ялгааг нэгтгэн харуулав.
Тогтоон – Изократик ба градиент элюци
Исократ шүүрэлт ба градиент элюц нь хөдөлгөөнт фазын шинж чанарыг тодорхойлдог. Изократ болон градиент элюцийн гол ялгаа нь изократ элюци нь хөдөлгөөнт фаз дахь тогтмол концентрацийг хадгалахыг хэлдэг бол градиент элюц нь хөдөлгөөнт фазын янз бүрийн концентрацийг хадгалахыг хэлнэ.
