Гол ялгаа – Хэвтээ ба босоо гель электрофорез
Гель электрофорез нь ДНХ, РНХ болон бусад уураг агуулсан хольцыг цэнэг, молекулын хэмжээгээр нь ялгах генетикийн шинжлэх ухаанд ашигладаг лабораторийн арга юм. Энэ аргаар салгах шаардлагатай ДНХ, РНХ эсвэл уураг нь жижиг нүх агуулсан гельээр дамждаг. Молекулууд нь цахилгаан талбараар гельээр дамжин хөдөлдөг. Молекулууд гельний нүхээр дамждаг бөгөөд хөдөлгөөний хурд нь тэдгээрийн урттай урвуу хамааралтай байдаг. Тиймээс молекулын хэмжээ багатай молекулууд өндөр молекул жинтэй молекулуудаас илүү хурдан хөдөлдөг. Цахилгаан талбар нь гельний хоёр төгсгөлийн цэнэгийн зөрүүгээр үүсдэг. Нэг төгсгөл нь эерэг цэнэгтэй, нөгөө төгсгөл нь сөрөг цэнэгтэй байдаг. ДНХ ба РНХ молекулууд сөрөг цэнэгтэй тул гелийн эерэг цэнэгтэй төгсгөл рүү татагдана. Гель электрофорез нь хэвтээ гель электрофорез ба босоо гель электрофорез гэсэн хоёр өөр арга байж болно. Хэвтээ гель электрофорезийн үед гель нь хэвтээ байрлалтай байх ба гель хайрцагны дотор байгаа тасралтгүй ажиллаж буй буферт живдэг. Босоо гель электрофорезын үед буфер систем нь босоо чиглэлд чиглэгддэг бөгөөд тасалдалтай, дээд ба доод хэсэгт катод, анод бүхий хоёр танхимтай байдаг. Энэ бол хэвтээ ба босоо гель электрофорезын гол ялгаа юм.
Хэвтээ гель электрофорез гэж юу вэ?
Хэвтээ гель электрофорез нь ДНХ, РНХ эсвэл уургийн молекулуудыг молекулын хэмжээ, цэнэгийн дагуу ялгах үндсэн онолыг ашигладаг. Энэ техникт гель нь хэвтээ байрлалтай байх ба тасралтгүй буферт живдэг. Агароз гель нь гель хайрцгийг хоёр тасалгаанд тусгаарлахад хэрэглэгддэг. Гель хайрцагны нэг үзүүр нь анод, нөгөө үзүүр нь катод агуулдаг. Гүйдэл хэрэглэх үед энэ техникт ашигласан буфер нь цэнэгийн градиент үүсгэх боломжийг олгодог. Цэнэглэх үед гель нь халах хандлагатай байдаг. Буфер нь температурыг оновчтой түвшинд байлгадаг хөргөлтийн үүрэг гүйцэтгэдэг. Ажиллаж буй буферийн эргэлт нь рН градиент үүсэхээс сэргийлдэг. Гель системийн хоёр тасалгаа нь ажиллаж байгаа буфертэй холбогддог тул тасалдалтай буфер системийг хэвтээ гель электрофорезид ашиглах боломжгүй. Акриламидыг гель электрофорезын үед уургийн хольцыг ялгахад ашигладаг.
Зураг 01: Хэвтээ гель электрофорез
Хэвтээ гель электрофорез хийхэд акриламидыг хэрэглэх боломжгүй, учир нь гель хайрцаг нь хүчилтөрөгчийн нөлөөнд автдаг. Хүчилтөрөгч байгаа тул акриламидын полимержилтийг дарангуйлдаг бөгөөд энэ нь гель үүсэхэд саад болдог. Хэвтээ гель электрофорез нь ДНХ ба РНХ-г салгахад ашигладаг хялбар арга юм.
Босоо гель электрофорез гэж юу вэ?
Босоо гель электрофорезийн техник нь гель электрофорезын үндсэн онолын дагуу ажилладаг боловч хэвтээ гель электрофорезийн аргаас илүү төвөгтэй гэж үздэг. Энэ техник нь тасалдалгүй буфер ашигладаг. Дээд камерт катод, доод камерт анод байрладаг. Тасалгаа бүрт байгаа электродууд нь шаардлагатай цахилгаан талбарыг хангадаг. Хоёр суурилуулсан шилэн хавтангийн хооронд нимгэн гель давхарга хийнэ. Тиймээс гельний дээд хэсэг нь дээд камерт, доод хэсэг нь доод хэсэгт байрлах камерт живдэг. Гүйдлийг хэрэглэсний дараа буферын багахан хэсэг нь гельээр дамжин дээд танхимаас доод камер руу шилждэг. Энэ техникт ашигласан гүйдэл нь минутын нэгж юм.
Зураг 02: Босоо гель электрофорез
Босоо гель электрофорезын үед буфер зөвхөн гель дундуур урсдаг. Энэ нь салгах үе шатанд хүчдэлийн налууг нарийн хянах боломжийг олгодог. Тасалгаанууд нь агаар мандлын хүчилтөрөгчийн нөлөөнд автдаггүй тул акриламидын гель хэрэглэж болно. Акриламидын гель нь нүх сүвний хэмжээ бага тул илүү өндөр нарийвчлалтайгаар нарийн ялгах боломжтой.
Хэвтээ ба босоо гель электрофорезын хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- Хоёр систем нь гель электрофорезын үндсэн онолын дагуу ажилладаг.
- Анод болон катодыг хоёр системд шаардлагатай цахилгаан талбарыг хангахад ашигладаг.
Хэвтээ ба босоо гель электрофорез хоёрын ялгаа юу вэ?
Хэвтээ ба босоо гель электрофорез |
|
| Хэвтээ гель электрофорез нь гель нь хэвтээ байрлалтай байх гель электрофорезийн арга юм. | Босоо гель электрофорез нь гелийг босоо чиглэлд чиглүүлдэг гель электрофорезын арга юм. |
| Буфер | |
| Хэвтээ гель электрофорез нь тасралтгүй буферээс бүрдэнэ. | Босоо гель электрофорезийн үед ажиллаж байгаа буфер тасалдалтай байдаг. |
| Акриламидын хэрэглээ | |
| Гель хайрцаг нь агаар мандлын хүчилтөрөгчийн нөлөөнд автдаг тул акриламидыг хэвтээ гель электрофорез хийхэд ашиглах боломжгүй. | Гель нь хоёр тусдаа камертай тул агаар мандлын хүчилтөрөгчийн нөлөөнд автдаггүй тул акриламидыг босоо гель электрофорез хийхэд ашиглаж болно. |
| Функц | |
| Хэвтээ гель электрофорез нь уураг биш харин ДНХ ба РНХ-ийн хольцыг салгахад ихэвчлэн ашиглагддаг. | Босоо гель электрофорез нь уургийн хольцыг ялгахад хэрэглэгддэг. |
Тойм – Хэвтээ ба босоо гель электрофорез
Гель электрофорез нь ДНХ, РНХ, уургийн молекул агуулсан хольцыг ялгахад өргөн хэрэглэгддэг лабораторийн арга юм. Гель электрофорез хийх хоёр арга байдаг: хэвтээ ба босоо гель электрофорез. Хэвтээ гель электрофорезийн үед ажиллаж буй буфер нь тасралтгүй, босоо гель электрофорезийн үед тасалдалтай байдаг. Энэ нь хэвтээ ба босоо гель электрофорезийн ялгаа юм. Хоёр систем хоёулаа гель электрофорезийн нийтлэг зарчмын дагуу ажилладаг.
Хэвтээ ба босоо гель электрофорезийн PDF хувилбарыг татаж авах
Та энэ нийтлэлийн PDF хувилбарыг татаж аваад офлайн зорилгоор ашиглах боломжтой. PDF хувилбарыг эндээс татаж авна уу. Хэвтээ ба босоо гель электрофорезийн ялгаа.
