Гол ялгаа – Урсгалын цитометр ба FACS
Эсийн онолын хүрээнд эс нь бүх амьд организмын үндсэн бүтэц, үйл ажиллагааны нэгж юм. Эсийн ангилах нь физиологи, морфологийн онцлогоос хамааран өөр өөр эсийг ялгахад ашигладаг аргачлал юм. Эдгээр нь эсийн доторх болон эсийн гаднах шинж чанартай байж болно. ДНХ, РНХ, уургийн харилцан үйлчлэлийг эсийн доторх харилцан үйлчлэл гэж үздэг бол хэлбэр, хэмжээ, гадаргуугийн янз бүрийн уураг нь эсийн гаднах шинж чанар гэж тооцогддог. Орчин үеийн шинжлэх ухаанд эсийг ялгах арга зүй нь биологийн судалгаанд янз бүрийн судалгаа хийх, мөн анагаах ухааны судалгаагаар шинэ зарчмуудыг бий болгоход хүргэсэн. Эсийн ангиллыг бага тоног төхөөрөмжтэй анхдагч, нарийн техник ашигласан дэвшилтэт технологийн аргуудыг багтаасан янз бүрийн арга зүйгээр явуулдаг. Урсгалын цитометр, флюресцент идэвхижүүлсэн эсийн ангилах (FACS), соронзон эсийн сонголт, нэг эсийн ангилах зэрэг нь ашигласан гол арга зүй юм. Урсгалын цитометр ба FACS нь эсийг оптик шинж чанараар нь ялгах зорилгоор бүтээгдсэн. FACS нь урсгалын цитометрийн тусгай төрөл юм. Урсгалын цитометр нь эсийн гадаргуугийн янз бүрийн молекулууд, хэмжээ, эзэлхүүний дагуу эсийн янз бүрийн популяцийг шинжлэхэд ашигладаг аргачлал бөгөөд нэг эсийг судлах боломжийг олгодог. FACS нь эсийн дээжийн хольцыг гэрлийн тархалт, флюресценцийн шинж чанараар нь хоёр буюу түүнээс дээш саванд ангилах процесс юм. Энэ бол урсгалын цитометр ба FACS хоёрын гол ялгаа юм.
Урсгалын цитометр гэж юу вэ?
Урсгалын цитометр нь эсийн доторх молекулууд болон эсийн гадаргуугийн илэрхийлэлийг судлах, тодорхойлох, эсийн ялгаатай төрлийг тодорхойлох, тодорхойлоход ашигладаг арга юм. Энэ нь эсийн хэмжээ, эсийн хэмжээг тодорхойлох, тусгаарлагдсан дэд популяцийн цэвэр байдлыг үнэлэхэд ашиглагддаг. Энэ нь нэг нүдийг нэг дор олон параметрт үнэлэх боломжийг олгодог. Урсгалын цитометрийг флюресцентээр тэмдэглэсэн эсрэгбиемүүдийн улмаас үүссэн флюресценцийн эрчмийг хэмжихэд ашигладаг бөгөөд энэ нь холбогдох эсүүдтэй холбогддог уураг эсвэл лигандуудыг тодорхойлоход тусалдаг.
Зураг 01: Урсгалын цитометр
Ерөнхийдөө урсгалын цитометр нь үндсэндээ гурван дэд системийг агуулдаг. Эдгээр нь шингэн, электроник, оптик юм. Урсгалын цитометрийн хувьд эсийг ангилахад ашигладаг таван үндсэн бүрэлдэхүүн хэсэг байдаг. Эдгээр нь урсгалын эс (тэдгээрийг зөөвөрлөж, оптик мэдрэгч хийх процесст эсийг тэгшлэхэд ашигладаг шингэний урсгал), хэмжилтийн систем (мөнгөн ус ба ксенон чийдэн, өндөр хүчин чадалтай усан хөргөлттэй эсвэл өөр өөр системтэй байж болно) юм. бага чадлын агаарын хөргөлттэй лазер эсвэл диодын лазер), ADC; Аналогоос дижитал хөрвүүлэгч систем, өсгөлтийн систем, дүн шинжилгээ хийх компьютер. Авах гэдэг нь урсгалын цитометр ашиглан дээжээс мэдээлэл цуглуулах үйл явц юм. Энэ процесс нь урсгалын цитометртэй холбогдсон компьютерээр дамждаг. Компьютерт байгаа програм хангамж нь урсгалын цитометрээс компьютерт ирж буй мэдээлэлд дүн шинжилгээ хийдэг. Програм хангамж нь урсгалын цитометрийг хянах туршилтын параметрүүдийг тохируулах чадвартай.
FACS гэж юу вэ?
Урсгалын цитометрийн хүрээнд Флюресценц идэвхжсэн эсийн ангилах (FACS) нь биологийн эсийн холимог дээжийг ялгах, ангилахад ашигладаг арга юм. Эсүүд нь хоёр ба түүнээс дээш савнаас тусгаарлагдсан байдаг. Ангилах арга нь эсийн гэрлийн тархалт, флюресценцийн шинж чанарыг агуулсан эсийн физик шинж чанарт суурилдаг. Энэ бол эс бүрээс ялгарах флюресценцийн дохионы тоон болон чанарын найдвартай үр дүнг гаргахад ашиглаж болох шинжлэх ухааны чухал арга юм. FACS-ийн үед эхлээд эсийн урьдчилан олж авсан холимог; суспенз нь хурдан урсаж буй шингэний нарийн урсгалын төв рүү чиглэнэ. Шингэний урсгал нь эс тус бүрийн голч дээр үндэслэн суспенз дэх эсүүдийг салгахын тулд хийгдсэн байдаг. Чичиргээний механизмыг суспензийн урсгалд хэрэглэснээр бие даасан дусал үүсдэг.
Зураг 02: FACS
Нэг нүдтэй нэг дусал үүсгэхийн тулд системийг тохируулсан. Дусал үүсэхээс өмнөхөн урсгалын суспенз нь эс бүрийн флюресценцийн шинж чанарыг илрүүлдэг флюресцент хэмжих аппаратын дагуу хөдөлдөг. Дусал үүсэх цэг дээр флюресценцийн эрчмийг хэмжихээс өмнө цагирагт цэнэгийг өдөөдөг цахилгаан цэнэглэгч цагираг байрлуулна. Суспензийн урсгалаас дуслууд үүссэний дараа дусал дотор цэнэг хуримтлагддаг бөгөөд дараа нь цахилгаан статик хазайлтын системд ордог. Төлбөрийн дагуу систем нь дуслыг өөр өөр саванд шилжүүлдэг. Төлбөрийг хэрэглэх арга нь FACS-д ашигладаг өөр өөр системээс хамаарч өөр өөр байдаг. FACS-д ашигладаг төхөөрөмжийг флюресцент идэвхижүүлсэн эс ялгагч гэж нэрлэдэг.
Урсгалын цитометр ба FACS хоёрын ижил төстэй зүйл юу вэ?
Урсгалын цитометр ба FACS нь эсийг оптик шинж чанараар нь ялгах зорилгоор бүтээгдсэн
Урсгалын цитометр ба FACS хоёрын ялгаа юу вэ?
Урсгалын цитометр ба FACS |
|
| Урсгалын цитометр нь эсийн гадаргуугийн янз бүрийн молекул, хэмжээ, эзэлхүүний дагуу эсийн янз бүрийн популяцийг шинжлэхэд нэг эсийг судлах боломжийг олгодог аргачлал юм. | FACS нь эсийн дээжийг гэрлийн тархалт болон флюресценцийн шинж чанараар нь хоёр буюу түүнээс дээш саванд ангилах процесс юм. |
Хураангуй – Урсгалын цитометр ба FACS
Эс нь бүх амьд организмын үндсэн бүтэц, үйл ажиллагааны нэгж юм. Эс ангилах нь эсийг эсийн доторх болон эсийн гаднах шинж чанараар нь ялгаж, өөр өөр ангилалд хуваах үйл явц юм. Урсгалын цитометр ба FACS нь эсийг ялгах хоёр чухал арга зүй юм. Эдгээр хоёр процесс нь эсийг оптик шинж чанараар нь ялгахын тулд боловсруулагдсан байдаг. Урсгалын цитометр нь эсийн гадаргуугийн янз бүрийн молекулууд, хэмжээ, эзэлхүүний дагуу эсийн янз бүрийн популяцийг шинжлэхэд ашигладаг аргачлал бөгөөд нэг эсийг судлах боломжийг олгодог. FACS нь эсийн дээжийн хольцыг гэрлийн тархалт, флюресценцийн шинж чанараар нь хоёр буюу түүнээс дээш саванд ангилах процесс юм. Энэ бол Flow Cytometry болон FACS хоёрын ялгаа юм.
Flow Cytometry ба FACS-ийн PDF хувилбарыг татаж авах
Та энэ нийтлэлийн PDF хувилбарыг татаж аваад офлайн зорилгоор ашиглах боломжтой. PDF хувилбарыг эндээс татаж авна уу Урсгалын цитометр ба FACS хоорондын ялгаа
