Хроматофокус ба изоэлектрик фокусын гол ялгаа нь хроматофокус нь ион солилцооны давирхайг ашигладаг баганын хроматографийн арга бөгөөд изоэлектрик фокус нь хөдөлгөөнгүй рН градиент гель ашигладаг электрофорезийн нэг төрөл юм.
Хроматофокус ба изоэлектрик фокус нь уурагуудыг изоэлектрик цэгээр нь ялгадаг хоёр арга юм. Хроматофокус ба изоэлектрик фокус хоёулаа маш сайн шийдвэрлэх чадвартай. Хроматофокус нь өндөр нарийвчлалтай баганын хроматографийн арга бөгөөд изоэлектрик фокус нь электрофорез ялгах арга юм. Түүнчлэн изоэлектрик фокус нь цахилгаан талбар шаарддаг бол хроматофокус нь цахилгаан талбарыг ашигладаггүй.
Хроматофокус гэж юу вэ?
Хроматофокус нь уурагуудыг изоэлектрик цэгийн ялгааны дагуу ялгадаг өндөр элюцийн хроматографийн нэг төрөл юм. Энэ нь ион солилцооны давирхайн багана болон дотооддоо боловсруулсан рН градиентийг ашигладаг. Изоэлектрик фокусаас ялгаатай нь хроматофокус нь цахилгаан талбарыг агуулдаггүй. Хроматофокус нь зөвхөн 0.02 рН нэгжээр ялгаатай маш төстэй молекулуудыг шийдэж чаддаг хүчирхэг цэвэршүүлэх арга юм. Иймд хроматофокус нь маш төстэй бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг салгахад өндөр нарийвчлал шаардлагатай үед өнгөлгөөний эцсийн алхам болгон хамгийн тохиромжтой.
Хроматофокус хийхдээ дээжийг эхлүүлэх буфертэй хольж баганад хэрэглэнэ. Изоэлектрик цэгээс дээш рН-д байгаа уургууд нь сөрөг цэнэгтэй бөгөөд баганын дээд хэсэгт ойрхон үлддэг бол изоэлектрик цэгээс доогуур рН-д байгаа бусад уурагууд баганын дагуу шилжинэ. Хамгийн өндөр изоэлектрик цэгтэй уураг эхлээд ялгаруулж, хамгийн бага изоэлектрик цэгтэй уураг нь баганаас хамгийн сүүлд ялгардаг. Энэ техникт уургийн тунадас, рН градиентийн шугаман байдал зэрэг хэд хэдэн хүчин зүйл нөлөөлдөг.
Изоэлектрик фокус гэж юу вэ?
Изоэлектрик фокус нь янз бүрийн молекулуудыг изоэлектрик цэг дээр үндэслэн ялгах арга юм. Үүнийг цахилгаан фокус гэж бас нэрлэдэг. Энэ аргыг гель дэх уураг ялгахад ихэвчлэн ашигладаг. Изоэлектрик фокусын үед дээжийг хөдөлгөөнгүй рН градиент (IPG) гель болгон нэмнэ. IPG гель нь рН градиент бүхий сополимержуулсан акриламид гель матриц юм. Уургууд нь изоэлектрик цэгүүдийн рН мужийг олох хүртэл катод руу шилждэг. Уураг нь цэвэр цэнэггүй рН-д хүрэхэд шилжилт хөдөлгөөн зогсч, хөдөлгөөнгүй зурвас үүсгэдэг. Үүний нэгэн адил уураг бүр өөрийн изоэлектрик цэгт харгалзах рН градиентийн цэг дээр зурвас үүсгэдэг.
Зураг 01: изоэлектрик фокус
Изоэлектрик фокус нь хоёр хэмжээст гель электрофорезийн эхний алхам юм. Энэ техникээр уургуудыг эхлээд изоэлектрик цэгүүдийн дагуу изоэлектрик фокусаар ялгаж, дараа нь SDS-PAGE-ээр молекулын жингээр нь ялгадаг.
Хроматофокус ба изоэлектрик фокусын хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- Хроматофокус ба изоэлектрик фокус нь маш сайн шийдвэрлэх хоёр арга юм.
- Хоёулаа уургийн изоэлектрик цэг дээр суурилдаг.
- Эдгээр техник нь рН градиент ашигладаг.
- Энэ хоёр процедур нь хүний гемоглобины хувилбаруудыг тодорхойлоход зориулагдсан.
- Тэд pI-ийн утга нь 0.02 рН нэгжээр ялгаатай молекулуудыг шийдэж чадна.
Хроматофокус ба изоэлектрик фокус хоёр юугаараа ялгаатай вэ?
Хроматофокус нь уурагуудыг изоэлектрик цэгээр нь ялгадаг өндөр нарийвчлалтай баганын хроматографийн арга юм. Үүний эсрэгээр изоэлектрик фокус нь хялгасан судсанд үүссэн рН градиентийн дагуу цахилгаан талбар ашиглах замаар уурагуудыг изоэлектрик цэгийн дагуу ялгадаг электрофорезийн арга юм. Тэгэхээр энэ нь хроматофокус ба изоэлектрик фокусын гол ялгаа юм.
Хроматофокус ба изоэлектрик фокусын өөр нэг ялгаа нь хроматофокус нь цахилгаан талбарыг оролцуулдаггүй, харин изоэлектрик фокус нь цахилгаан орон шаарддаг.
Хураангуй – Хроматофокус ба изоэлектрик фокус
Хроматофокус ба изоэлектрик фокус нь молекулуудыг, ялангуяа маш төстэй молекулуудыг шийдвэрлэх өндөр чадвартай ижил төстэй хоёр арга юм. Хроматофокус нь өндөр нарийвчлалтай баганын хроматографийн арга бөгөөд изоэлектрик фокус нь электрофорезийн арга юм. Хроматофокус нь изоэлектрик фокусаас ялгаатай нь цахилгаан талбарыг агуулдаггүй. Ингэснээр хроматофокус ба изоэлектрик фокус хоёрын ялгааг нэгтгэн харуулав.
