BCA болон Брэдфордын шинжилгээний гол ялгаа нь BCA-ийн шинжилгээ нь цаг хугацаа их шаарддаг бөгөөд нарийвчлал багатай байдаг бол Брэдфордын шинжилгээ нь хурдан бөгөөд үнэн зөв байдагт оршино.
BCA болон Брэдфордын шинжилгээ нь уургийн концентрацийг тодорхойлох хоёр шинжилгээний арга юм. Эдгээр хоёр шинжилгээ нь шинжилгээний өөр зарчимтай бөгөөд нарийвчлалын хувьд ялгаатай.
BCA шинжилгээ гэж юу вэ?
BCA шинжилгээ эсвэл бицинхониний хүчлийн шинжилгээ нь уусмал дахь уургийн нийт концентрацийг тодорхойлоход хэрэгтэй биохимийн шинжилгээ юм. Энэ аргыг мөн зохион бүтээгч Пол К. Смитийн нэрээр Смитийн шинжилгээ гэж нэрлэдэг. Энэхүү аналитик арга нь Lowry уургийн шинжилгээ, Брэдфордын уургийн шинжилгээ эсвэл биурет урвалжтай ижил төстэй байдлыг харуулж байна. Өгөгдсөн дээжин дэх уургийн нийт концентрацийг бид дээжийн уусмалын өнгөний өөрчлөлтөөр ажиглаж болно, энэ нь ногоонаас нил ягаан өнгөтэй байна. Энэ өнгөний өөрчлөлт нь уургийн агууламжтай пропорциональ тохиолддог. Үүний дараа бид дээж дэх өнгөний эрч хүч, уургийн агууламжийг шинжлэхийн тулд өнгө хэмжигч техникийг ашиглаж болно.
ВСА уургийн тооцооллын арга
BCA-ийн шинжилгээний механизмыг авч үзэхэд ердийн BCA уусмал нь ойролцоогоор 11.25 рН-тай өндөр шүлтлэг уусмал агуулдаг бөгөөд энэ уусмалын найрлагад бицинхониний хүчил, натрийн карбонат, натрийн бикарбонат, натрийн тартрат, болон зэс (II) сульфатын пентагидрат. Энэхүү шинжилгээ нь үндсэндээ хоёр химийн урвалаас шалтгаална: уураг дахь пептидийн холбоогоор зэс (II) -ийг зэс (I) болгон бууруулж, бицинхониний хүчлийн хоёр молекулыг зэс (I) ионтой хольж, нил ягаан өнгийн цогцолбор үүснэ. 562 нм долгионы урттай гэрлийг шингээх. Эхний урвалд пептидийн холбоогоор буурсан зэс (II) хэмжээ нь дээж дэх уургийн хэмжээтэй пропорциональ байна.
Бредфордын шинжилгээ гэж юу вэ?
Брэдфордын шинжилгээ нь уусмал дахь уургийн концентрацийг хэмжихэд тустай спектроскопийн аналитик арга юм. Энэ аргыг 1976 онд Марион М. Брэдфорд боловсруулсан бөгөөд энэ нь харьцангуй хурдан бөгөөд үнэн зөв арга юм.
Уураг ба Брэдфордын урвалжийн өнгөт урвал
Бид энэ аргыг ашиглан дээжин дэх уургийн хэмжээг тодорхойлж болно. Энэ шинжилгээний явцад дээжинд явагдах химийн урвал нь зөвхөн дээжин дэх уургийн амин хүчлийн найрлагаас хамаарна.
Уургийн үнэлгээний Брэдфордын арга
Энэ шинжилгээний аргыг авч үзэхэд энэ нь Coomassie Brilliant Blue G-250 нэртэй будгийн шингээлтийн шилжилт дээр үндэслэсэн колориметрийн уургийн шинжилгээ юм. Ерөнхийдөө энэ будаг нь анионик (цэнхэр) хэлбэр, төвийг сахисан (ногоон) хэлбэр, катион (улаан) хэлбэр гэсэн гурван хэлбэрээр байдаг. Тиймээс хүчиллэг нөхцөлд будаг нь улаанаас цэнхэр болж өнгө өөрчлөгддөг. Энэ нь уураг нь будагтай холбоотой байдагтай холбоотой юм. Үүний эсрэгээр, хэрэв будагтай холбох уураг байхгүй бол өнгө өөрчлөгдөхгүй, уусмал нь улаан хүрэн өнгөтэй болно. Энэхүү будаг нь Ван дер Ваалын хүч болон электростатик таталцлаар уургийн карбоксил бүлэгтэй хүчтэй, ковалент бус цогцолбор үүсгэх чадвартай.
BCA болон Bradford Assay хоёрын ялгаа юу вэ?
BCA болон Брэдфордын шинжилгээ нь уургийн концентрацийг тодорхойлох хоёр шинжилгээний арга юм. Эдгээр хоёр шинжилгээ нь шинжилгээний өөр зарчимтай бөгөөд тэдгээрийн нарийвчлалын ялгаа байдаг. BCA болон Брэдфордын шинжилгээний гол ялгаа нь BCA шинжилгээ нь цаг хугацаа их шаарддаг бөгөөд нарийвчлал багатай байдаг бол Брэдфордын шинжилгээ нь хурдан бөгөөд үнэн зөв байдаг.
Дараах инфографик нь BCA болон Брэдфордын шинжилгээний ялгааг хүснэгт хэлбэрээр нэгтгэн харуулав.
Хураангуй – BCA ба Брэдфордын шинжилгээ
BCA шинжилгээ эсвэл бицинхониний хүчлийн шинжилгээ нь уусмал дахь уургийн нийт концентрацийг тодорхойлоход хэрэгтэй биохимийн шинжилгээ юм. Брэдфордын шинжилгээ нь уусмал дахь уургийн концентрацийг хэмжихэд тустай спектроскопийн аналитик арга юм. BCA болон Брэдфордын шинжилгээний гол ялгаа нь BCA нь цаг хугацаа их шаарддаг бөгөөд нарийвчлал багатай байдаг бол Брэдфордын шинжилгээ нь хурдан бөгөөд үнэн зөв байдаг.
