Колорометр ба флюрометрийн шинжилгээний гол ялгаа нь колориметрийн шинжилгээ нь уусмал дахь өнгөт нэгдлүүдийн концентрацийг тодорхойлдог бол флюрометрийн шинжилгээ нь уусмалын кинетик механизмыг тодорхойлдогт оршино.
Биохимийн шинжилгээ нь биологийн молекул эсвэл бодисын идэвхийг аналитик аргаар илрүүлдэг эсвэл тоон үзүүлэлтээр тодорхойлдог арга юм. Энэ нь in vitro процесс юм. Колориметрийн шинжилгээ ба флюрометрийн шинжилгээ нь лабораторид хийгддэг нийтлэг биохимийн хоёр төрлийн шинжилгээ юм. ELISA, western blotting гэх мэт олон аргууд нь уураг, фермент болон бусад жижиг молекулууд зэрэг биомолекулуудын үйл ажиллагааны төлөв байдлыг хэмжих, бодисын солилцооны үйл ажиллагааг хэмжих цогц биохимийн шинжилгээ юм. Эдгээр төрлийн шинжилгээг уураг-ДНХ, уураг-РНХ, уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийг тодорхойлоход ашигладаг.
Колориметрийн шинжилгээ гэж юу вэ?
Колориметрийн шинжилгээ нь уусмал дахь өнгөт нэгдлүүдийн концентрацийг тодорхойлох арга юм. Өөрөөр хэлбэл, колориметрийн шинжилгээ нь урвалж болон аналитуудын хоорондох ферментийн болон химийн урвалын улмаас өнгө өөрчлөгдөхөд хүргэдэг урвал юм. Колориметрийн шинжилгээг биохимид фермент, өвөрмөц нэгдлүүд, гормон, эсрэгбие болон бусад аналитуудыг шалгах зорилгоор ашигладаг. Тэд колориметр эсвэл спектрофотометр ашигладаг. Колориметрүүд нь өнгөт шинж чанарыг бодитой хэмжих зорилгоор өнгөт дээжийг тодорхойлдог багаж юм. Спектрофотометр нь гэрлийн өнгө эсвэл долгионы уртаас хамаарч гэрлийн эрчмийг хэмждэг төхөөрөмж юм.
Зураг 01: Колориметрийн шинжилгээ
Колориметрийн шинжилгээ хэрхэн ажилладаг вэ?
Колориметрийн шинжилгээнд худагтай холбогдсон тодорхой эсрэгбие бүхий хавтанг бэлтгэдэг. Дараа нь дээжийг нэмнэ. Энэ нь дээжийг эсрэгбиетэй холбох боломжийг олгоно. Дараа нь илрүүлэх датчиктай урвалд орохын тулд цооногуудад илрүүлэх эсрэгбие болон субстрат нэмнэ. Уншихын өмнөх төгсгөлд зогсоох уусмалыг нэмнэ. Хоосон гэж нэрлэгддэг хоосон худаг дээжгүй үлддэг. Колориметрийн шинжилгээнд өнгө нь бараан байх тусам аналитын концентраци ихэсдэг. Уншихад ихэвчлэн нэг долгионы урт шаардлагатай байдаг. Гэхдээ лавлагаа хэмжилт байгаа бол хоёр ба түүнээс дээш долгионы уртыг ашиглана.
Флуорометрийн шинжилгээ гэж юу вэ?
Флюрометрийн шинжилгээ нь ферментийн урвалын кинетик механизмыг тодорхойлдог арга юм. Флуорометрийн шинжилгээ нь флюресцент бус субстратаас флюресцент бүтээгдэхүүн үүсэх эсвэл эсрэгээр явагддаг. Энэхүү шинжилгээ нь мөн флюресценцийн резонансын энергийн дамжуулалтыг (FRET) ашигладаг бөгөөд ферментийн урвал нь субстрат дахь хоёр флюрофорын байрлалыг өөрчилснөөр флюресценцийн эрчмийг өөрчилдөг.
Зураг 02: Флюрометрийн шинжилгээ
Флюорометрийн шинжилгээ нь ерөнхийдөө бусад шинжилгээнүүдээс хамаагүй илүү мэдрэмтгий байдаг. Өвчтөний эд, эс эсвэл шингэний дээж дэх оношлогооны ферментийн үнэлгээ нь өндөр мэдрэмжтэй учраас нэмэгддэг.
Флюрометрийн шинжилгээ хэрхэн ажилладаг вэ?
Флюрометрийн шинжилгээнд хавтан дахь дээжинд субстрат нэмж, флюресценцийн хариуг хавтан уншигч ашиглан авна. Энд эс бүрийг тусад нь хэмждэг. Флюрометрийн шинжилгээнд тунгалаг бус хавтанг ашигладаг. Энэ нь гэрлийн тархалтыг бууруулдаг. Энэ төрлийн шинжилгээнд хоёр долгионы урт шаардлагатай. Нэг долгионы урт нь өдөөлтийг илрүүлэх, нөгөө долгионы урт нь ялгаруулалтад зориулагдсан.
Колорометрийн болон Флюрометрийн шинжилгээний хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- Colorimetric assay болон fluorometric assay нь хоёр төрлийн биохимийн шинжилгээ юм.
- Хоёр шинжилгээг эрүүл мэндийн оношлогоонд зориулж хийсэн.
- Эдгээр шинжилгээнд ферментийн урвал орно.
- Хоёр шинжилгээнд субстрат болон аналит орно.
Колориметрийн болон флюрометрийн шинжилгээний хооронд ямар ялгаа байдаг вэ?
Колориметрийн шинжилгээ нь уусмал дахь өнгөт нэгдлүүдийн концентрацийг тодорхойлох арга бол флюрометрийн шинжилгээ нь ферментийн урвалын кинетик механизмыг тодорхойлох арга юм. Тиймээс энэ нь колориметрийн болон флюрометрийн шинжилгээний гол ялгаа юм. Түүнээс гадна флюрометрийн шинжилгээ нь колориметрийн шинжилгээнээс илүү мэдрэмтгий байдаг; иймээс флюрометрийн шинжилгээ нь илүү олон аналитийг илрүүлэх чадвартай байдаг. Тиймээс энэ нь колориметрийн болон флюрометрийн шинжилгээний өөр нэг чухал ялгаа юм. Цаашилбал, флюрометрийн шинжилгээнд хоёр долгионы урт шаардлагатай бол колориметрийн шинжилгээг нэг долгионы урттай хийдэг.
Доорх инфографик нь колориметрийн болон флюрометрийн шинжилгээний хоорондын ялгааг харуулсан.
Хураангуй – Колориметр ба Флюрометрийн шинжилгээ
Биохимийн шинжилгээ нь эсийн бодисын солилцооны урвалыг тодорхойлох, хэмжихэд ашигладаг аналитик процесс юм. Колориметрийн шинжилгээ ба флюрометрийн шинжилгээ нь хоёр төрлийн биохимийн шинжилгээ юм. Колориметрийн шинжилгээ нь урвалж ба анализаторуудын хоорондох ферментийн эсвэл химийн урвалын улмаас өнгө өөрчлөгдөхөд хүргэдэг урвал бөгөөд флюрометрийн шинжилгээ нь ферментийн урвалын кинетик механизмыг тодорхойлоход хэрэглэгддэг арга юм. Хоёр шинжилгээ нь субстрат болон аналитыг хамарсан ферментийн урвалаас хамаардаг. Флюрометрийн шинжилгээ нь колориметрийн шинжилгээнээс илүү мэдрэмтгий байдаг. Хамгийн чухал нь флюрометрийн шинжилгээнд хоёр долгионы урт шаардлагатай байдаг бол колориметрийн шинжилгээг зөвхөн нэг долгионы урттай хийх боломжтой. Тиймээс энэ нь колориметрийн болон флюрометрийн шинжилгээний ялгааг нэгтгэн харуулав.
