Бредфорд болон Lowry уургийн шинжилгээний гол ялгаа нь Брэдфордын уургийн шинжилгээ нь Coomassie brilliant blue G-250 будагны шингээлтийн шилжилт дээр суурилдаг бол Lowry уургийн шинжилгээ нь зэсийн ионуудын (Cu+) ионуудын урвал дээр суурилдагт оршино. Фолин-Циокалтеу урвалжтай пептидийн холбоог исэлдүүлснээр үүсдэг.
Туршилт нь дээжийн үндсэн функциональ бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг тодорхойлоход тусалдаг аналитик арга юм. Тиймээс шинжилгээ нь чанарын болон тоон шинжилгээ байж болно. Лабораторийн анагаах ухаан, фармакологи, хүрээлэн буй орчны биологи, молекул биологи, биохими, дархлаа судлал зэрэг олон салбарт энэ төрлийн шинжилгээг тогтмол ашигладаг. Брэдфорд ба Лоури уургийн шинжилгээ нь дээжийн уусмал дахь уургийн концентрацийг тодорхойлдог биохимийн хоёр шинжилгээ юм. Хоёр шинжилгээ хоёулаа үр дүнг гаргахын тулд колориметрийн аргыг ашигладаг.
Бредфордын уургийн шинжилгээ гэж юу вэ?
Брэдфордын уургийн шинжилгээ нь уургийн шинжилгээнд зориулсан спектроскопийн хурдан шинжилгээний арга юм. Уусмал дахь уургийн концентрацийг хэмжихэд өндөр нарийвчлалыг харуулдаг. Марион Брэдфорд 1976 онд энэхүү процедурыг нэвтрүүлсэн. Энэхүү шинжилгээнд нийт урвалыг хэмжсэн уургийн амин хүчлийн найрлагад үндэслэнэ. Өөрөөр хэлбэл, Брэдфордын уургийн шинжилгээ нь колориметрийн шинжилгээ юм. Энэ нь Coomassie brilliant blue будаг хэрэглэдэг. Иймээс энэхүү колориметрийн уургийн шинжилгээ нь будгийн шингээлтийн шилжилтээс хамаарна. Coomassie brilliant blue G-250 нь катион (улаан), анионик (цэнхэр), төвийг сахисан (ногоон) гэсэн гурван хэлбэрээр байдаг. Хүчиллэг нөхцөлд будгийн улаан хэлбэр нь цэнхэр болж хувирдаг. Энэ нь уургийн холболтыг баталгаажуулдаг. Хэрэв уураг байхгүй бол уусмал нь бор өнгөтэй хэвээр үлдэж болно.
Зураг 01: Брэдфордын уургийн шинжилгээ
Брэдфордын уургийн шинжилгээ нь уургийн уусмалд агуулагдах янз бүрийн химийн нэгдлүүдийн хөндлөнгийн нөлөөнд бага өртдөг тул бусад уургийн шинжилгээнээс ялгаатай. Эдгээр нэгдлүүдэд натри, кали, глюкоз, сахароз зэрэг орно.
Лоури уургийн шинжилгээ гэж юу вэ?
Лоури уургийн шинжилгээ нь уусмал дахь уургийн нийт түвшинг тодорхойлох биохимийн шинжилгээ юм. Оливер Х. Лоури бол 1940 онд энэхүү урвалжийг бүтээсэн хүн юм. Уг процедур нь уусмал дахь уургийн концентрацитай пропорциональ өнгөний өөрчлөлтөөр уусмалын нийт уургийн концентрацийг дүрсэлдэг. Тиймээс энэ нь мөн колориметрийн уургийн шинжилгээ юм.
Пептидийн бондын исэлдэлтээс үүссэн зэсийн ион (Cu+) ба Фолин-Сиокалтеу урвалж хоорондын урвал нь энэхүү процедурын үндэс юм. Мөн энэ урвалж нь фосфомолибдик хүчил ба фосфор-волльдболдын хүчил агуулдаг. Гэсэн хэдий ч Lowry уургийн шинжилгээний хариу урвалын механизм сайн ойлгогдоогүй байна. Гэхдээ энэ нь Фолин-Циокалтеу урвалжийг бууруулснаар цистеин, триптофан, тирозин үлдэгдлийг исэлдүүлдэг.
Зураг 02: Lowry уургийн шинжилгээ
Цистеины үлдэгдэл нь Лоуригийн уургийн шинжилгээнд ажиглагдсан шингээлтийг бий болгоход хувь нэмэр оруулдаг ба урвалын үр дүнд гялалзсан хөх молекул үүсдэг; гетерополи молибдений хөх. Энэ молекулын бууралтыг 660 нм-ийн шингээлтээр хэмждэг. Тиймээс Фолин-Циокалтеу урвалжийг багасгасан цистеин ба триптофаны үлдэгдлийн концентраци нь уусмал дахь уургийн нийт концентрацийг гаргадаг.
Бредфорд болон Лоури уургийн шинжилгээний хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- Брэдфорд болон Лоури уургийн шинжилгээ нь уусмал дахь уургийн концентрацийг тодорхойлдог.
- Хоёр арга нь өнгө хэмжилтийн аргууд юм.
- Мөн хоёр аргын мэдрэмж өндөр байна.
Бредфорд болон Лоури уургийн шинжилгээ хоёр юугаараа ялгаатай вэ?
Брэдфорд болон Лоури уургийн шинжилгээ нь уусмал дахь уургийн концентрацийг тодорхойлдог хоёр төрлийн шинжилгээ юм. Брэдфордын уургийн шинжилгээ нь Coomassie гялалзсан цэнхэр G-250 будагны шингээлтийн шилжилтэд тулгуурладаг бол Lowry уургийн шинжилгээ нь пептидийн бондын исэлдэлтээс үүссэн зэсийн ионуудын Фолин-Циокалтеу урвалжтай хийсэн урвалаас хамаардаг. Энэ бол Брэдфорд ба Лоури уургийн шинжилгээний гол ялгаа юм. Брэдфордын уургийн шинжилгээнд 15 минут зарцуулдаг бол Lowery уургийн шинжилгээнд 40-60 минут зарцуулдаг. Тиймээс энэ нь Брэдфорд болон Лоури уургийн шинжилгээний өөр нэг ялгаа юм. Цаашилбал, Брэдфордын уургийн шинжилгээ нь амин хүчлийн найрлагаас хамаардаг бол Lowry уургийн шинжилгээ нь амин хүчлийн найрлагаас хэсэгчлэн хамаардаг. Тиймээс энэ нь Брэдфорд болон Лоуригийн уургийн шинжилгээний ялгаа юм.
Доорх инфорафик нь Брэдфорд болон Лоуригийн уургийн шинжилгээний ялгааны талаар дэлгэрэнгүй мэдээллийг өгдөг.
Хураангуй – Брэдфорд ба Лоури уургийн шинжилгээ
Шинжилгээ нь дээжийн үндсэн функциональ бүрэлдэхүүнийг тодорхойлоход ашигладаг аналитик арга юм. Брэдфорд ба Лоури уургийн шинжилгээ нь колориметрийн аргаар ажилладаг уургийн хоёр төрлийн шинжилгээ юм. Брэдфорд болон Лоури уургийн шинжилгээ хоёулаа уусмал дахь уургийн концентрацийг тодорхойлдог. Гэсэн хэдий ч Брэдфорд ба Лоури уургийн шинжилгээний гол ялгаа нь тэдний ашигладаг колориметрийн аргад оршдог. Брэдфордын уургийн шинжилгээнд Coomassie гялалзсан цэнхэр G-250-г ашигладаг бол Lowry уургийн шинжилгээнд зэсийн ион (Cu+) болон Фолин-Циокалтеу урвалжийг ашигладаг. Цаашилбал, Брэдфордын арга нь Lowry уургийн шинжилгээний үр дүнг хурдан өгдөг. Гэхдээ энэ хоёр арга нь маш мэдрэмтгий аргууд бөгөөд янз бүрийн бодисын хөндлөнгийн нөлөөнд автдаг.
