LAMP болон ПГУ-ын шинжилгээний гол ялгаа нь LAMP-ийг тогтмол температурт (60-650C) хийж олшруулах замаар ДНХ-ийн хуулбарыг гаргаж авдаг бол ПГУ-ыг хийдэг. Олшруулах замаар ДНХ-ийн хуулбарыг үүсгэхийн тулд температурын цуврал өөрчлөлтийг ашиглана.
LAMP болон ПГУ нь ДНХ-ийн мянга мянган хуулбарыг үйлдвэрлэхэд ашигладаг in vitro өсгөвөрлөх арга юм. LAMP-д үүссэн ДНХ-ийн хэмжээ нь RT-PCR гэх мэт ПГУ-ын аргад үйлдвэрлэсэн хэмжээнээс хамаагүй өндөр байдаг. LAMP бол ПГУ-ын техниктэй харьцуулахад шинэ техник юм. Гэхдээ энэ нь техникийн хувьд энгийн бөгөөд бэлтгэгдсэн эрдэмтэн лабораторийн нөхцөлд хийхэд хялбар байдаг. Энэ нь үүнийг COVID-19-ийг илрүүлэхэд хэрэг болохуйц техник болгож байна. Гэсэн хэдий ч RT-PCR нь COVID-19-ийн одоогийн стандарт шинжилгээ юм. Эдгээр аргууд нь ДНХ-ийн олшруулалтын чиглэлээр мэргэшсэн судлаачид болон эмч нарт сайн танигдсан ч өргөн хүрээний хүмүүст харьцангуй мэдэгдээгүй байж магадгүй.
LAMP Test гэж юу вэ?
COVID-19-ийн шинжилгээнд зориулсан гогцоонд зуучлагдсан изотермийн олшруулалт (LAMP) нь арчдас ашиглан хамар, хоолойноос дээж цуглуулахаас эхэлдэг. Мөн хатуу ханиалгах салиа гэх мэт бусад аргыг ашиглан дээжийг цуглуулж болно. RT-PCR гэх мэт ПГУ-ын техникийн нэгэн адил дээж дэх вирусын РНХ нь эхлээд ДНХ болж хувирдаг бөгөөд энэ нь түүнийг хуулбарлах боломжийг олгодог. LAMP урвалыг тогтмол температурт явуулдаг (60-650C).
ЛАМП технологи, урвалж агуулсан вирусын ДНХ-ийн олшрөлтийг "магнийн пирофосфат"-ын улмаас урвалын хольц үүлэрхэг болсон үед илрүүлж болно. Энэхүү үүлэрхэг байдал нь эрдэмтэд, эмч нарт COVID-19-ийг хялбархан оношлох боломжийг олгодог. Туршилтын үр дүнгийн нарийвчлалыг урвалын хольц дахь тусгай флюресцент будагч эсвэл өнгө өөрчлөгч будагч бодис ашиглан сайжруулж болно. Эдгээр будагч бодисууд нь вирусын ДНХ-тэй харилцан үйлчилдэг ба гэрлийн болон өнгөний өөрчлөлтийн эрчмийг хэмжиж, вирусын РНХ-ийн молекулуудын тоог ойролцоогоор гаргаж авах боломжтой.
ПГУ-ын шинжилгээ гэж юу вэ?
ПГУ нь ДНХ илрүүлэхэд 20-30 жилийн турш судалгаа, анагаах ухаанд өргөн хэрэглэгдэж ирсэн шинжлэх ухааны маш түгээмэл арга юм. ПГУ-ын шинжилгээг вирусын РНХ илрүүлэх замаар эсрэгтөрөгчийг илрүүлэхэд шууд ашигладаг. Ерөнхийдөө вирусын РНХ нь эсрэгбие илрүүлэх эсвэл өвчний шинж тэмдэг илрэхээс өмнө биед байдаг. Тиймээс ПГУ-ын шинжилгээ нь хэн нэгэнд вирус байгаа эсэхийг эрт илрүүлж чадна. Одоогоор ПГУ нь COVID-19-ийг илрүүлэх стандарт шинжилгээ юм. Бодит цагийн ПГУ, үүрлэсэн ПГУ, мультиплекс ПГУ, халуун эхлэл ПГУ, урт хугацааны ПГУ гэх мэт ПГУ-ын өөр өөр аргууд байдаг. ПГУ нь олшруулалтаар дамжуулан ДНХ-ийн хуулбарыг үүсгэхийн тулд хэд хэдэн температурын өөрчлөлтийг ашигладаг.
RT-PCR нь ПГУ-ын техникийн тусгай хувилбар юм. Энэ нь РНХ илрэх үед хэрэглэгддэг. Одоо үүнийг COVID-19-ийг туршихад ашиглаж байна. RT-PCR бол нэлээд мэдрэмтгий бөгөөд найдвартай арга юм. RT-PCR-д дээжийг цуглуулсны дараа химийн бодисыг хүсээгүй уураг, өөх тос болон бусад молекулуудыг зайлуулж, РНХ үлдээдэг. Туршилтын иж бүрдэл ферментүүд нь эхлээд РНХ-ийг ДНХ болгон хувиргадаг бөгөөд дараа нь вирусыг илрүүлэхийн тулд вирусын ДНХ-г олшруулдаг. Флюресцент будагч бодисыг ихэвчлэн олшруулсан ДНХ-тэй холбож, гэрэл үүсгэхэд ашигладаг. Туршилтын үр дүнг гаргахын тулд үүнийг машин уншиж болно.
LAMP болон ПГУ-ын шинжилгээний хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- Эдгээр нь өсгөлтийн техник юм.
- Хоёулаа хуулбарласан ДНХ үүсгэдэг.
- Эдгээр нь эсрэгбие илрүүлэх гэх мэт дархлааны техникээс маш мэдрэмтгий бөгөөд найдвартай арга юм.
- Тэд хоёулаа COVID-19-ийн шинжилгээнд ашиглагддаг.
LAMP болон ПГУ-ын шинжилгээний ялгаа юу вэ?
LAMP болон ПГУ-ын туршилтын гол ялгаа нь LAMP-д олшруулалтыг тогтмол температур (60-650C) ашиглан хийдэг бол ПГУ-д эргэлддэг. температур шаардлагатай. Одоогоор хэд хэдэн төрлийн LAMP техникийг ашиглах боломжтой. Гэхдээ COVID-19-ийг илрүүлэх хамгийн чухал зүйл бол урвуу транскрипцийн давталт-зуучлагч изотермийн техник (RT-LAMP) ба транскрипт-зуучлагч олшруулах (TMA) юм. Цаашилбал, бодит цагийн ПГУ, RT-ПГУ, үүрлэсэн ПГУ, мультиплекс ПГУ, халуун эхлэлийн ПГУ, урт хугацааны ПГУ гэх мэт өвчний оношилгооны хувьд одоогоор эмнэлзүйн практикт байгаа өөр өөр төрлийн ПГУ-ын аргууд байдаг.
Доорх инфографик нь LAMP болон ПГУ-ын тестийн ялгааг хүснэгт хэлбэрээр жагсаасан болно.
Хураангуй – LAMP ба ПГУ-ын тест
Гогцоонд зуучлагдсан изотермийн олшруулалт нь RT-PCR зэрэг ПГУ-ын шинжилгээтэй төстэй боловч тогтмол температурт вирусын ДНХ-ийн илүү хуулбарыг үүсгэдэг. Полимеразын гинжин урвалын шинжилгээ нь одоогоор COVID-19 гэх мэт өвчнийг оношлох дэлхийн хамгийн түгээмэл бөгөөд стандарт хэлбэр юм. Энэ нь нэлээд найдвартай гэж үздэг. ПГУ нь олшруулах замаар ДНХ-ийн хуулбарыг үүсгэхийн тулд хэд хэдэн температурын өөрчлөлтийг ашигладаг. Энэ нь LAMP болон ПГУ-ын тестийн ялгааг нэгтгэн харуулав.
