Элиспот ба Элиспот хоёрын гол ялгаа нь Элиза нь ялгарсан дохионы уургийн нийт концентрацийг тодорхойлдог ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинж чанартай байдаг бол Элиспот нь цитокин ялгаруулдаг эсийг тус тусад нь илрүүлдэг ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ юм.
Элиса ба Элиспот нь анагаах ухаан, ургамлын эмгэг судлал, биотехнологи болон эмийн янз бүрийн үйлдвэрүүдэд өргөн хэрэглэгддэг ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ юм. Эдгээр аргуудын хувьд уургийн аналитыг түүний эсрэг чиглэсэн эсрэгбиемээр илрүүлдэг. Элиза бол лабораторид ашигладаг хамгийн алдартай ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ юм. Нөгөөтэйгүүр, Элиспот нь ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ бөгөөд үүнийг Элизагийн оронд ашигладаггүй, харин лабораторид Элизагаас гадна ашигладаг.
Elisa Assay гэж юу вэ?
Элиса бол нууцлагдсан дохионы уургийн нийт концентрацийг тодорхойлдог ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ юм. Энэ нь 1971 онд Энгвалл, Перлманн нар анх тодорхойлсон өргөн хэрэглэгддэг аналитик биохимийн шинжилгээ юм. Энэхүү техник нь шингэний дээжинд тодорхой уураг байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд хатуу фазын ферментийн дархлааны шинжилгээг ашигладаг бөгөөд энэ өвөрмөц уургийн эсрэг чиглэсэн эсрэгбиемүүдийг ашигладаг. Энэхүү шинжилгээ нь анагаах ухаан, ургамлын эмгэг судлал, биотехнологид түгээмэл хэрэглэгддэг оношлогооны хэрэгсэл юм.
ЭЛИЗА тестийн механизм
ELISA тестийн ихэнх тохиолдолд эхэнд нь үл мэдэгдэх хэмжээний эсрэгтөрөгчийг хатуу тулгуур (микролитр хавтан) дээр хөдөлгөөнгүй болгодог. Дараа нь тохирох анхдагч эсрэгбиемийг хатуу тулгуур гадаргуу дээр хэрэглэнэ. Энэ эсрэгбие нь эсрэгтөрөгчтэй (эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор) цогцолбор үүсгэдэг. Антигентэй холбогдсон анхдагч эсрэгбиемийг биоконьюгациар дамжуулан ферменттэй холбосон хоёрдогч эсрэгбиемээр илрүүлж болно. Элизагийн тестийн эцсийн шатанд ферментийн субстрат агуулсан бодисыг нэмнэ. Хэрэв анхдагч эсрэгбие нь эсрэгтөрөгчтэй зохих ёсоор холбогдсон бол субстратаас өнгөний өөрчлөлтийг илрүүлдэг. Эцэст нь энэ нь дээж дэх эсрэгтөрөгчийн хэмжээг тодорхойлдог.
Зураг 01: Элизагийн янз бүрийн төрлүүд
Цаашилбал, Элизагийн талаар шууд Элиза, шууд бус Элиза гэх мэт өөр өөр хандлага байдаг. Одоогоор Элизагийн янз бүрийн сорилуудыг сүрьеэгийн микобактер, ротавирус, гепатит В, гепатит С вирус, энтеротоксин үүсгэдэг E.coli, ХДХВ, SARS-CoV-2 зэрэг хүний эмгэг төрүүлэгчдийг илрүүлэхэд ашиглаж байна.
Элиспотын шинжилгээ гэж юу вэ?
Элиспот нь цитокин ялгаруулдаг эсийг тус тусад нь илрүүлдэг ферменттэй холбоотой дархлааны шинжилгээ юм. Сесил Черкинский анх 1983 онд ELISpot-ийг тодорхойлсон. Энэ нь нэг эсийн цитокины шүүрлийн давтамжийг тоон байдлаар хэмжихэд чиглэгдсэн шинжилгээний төрөл юм. Үүнийг мөн биологийн болон химийн уургийн аналитыг илрүүлэхийн тулд эсрэгбие ашигладаг арга гэж ангилдаг. Флуороспотын шинжилгээ нь олон анализаторыг (илүү нууцлаг уураг) шинжлэхийн тулд флюресценцийг ашигладаг Элиспотын шинжилгээний хувилбар юм.
Элиспотын тестийн механизм
Энэ механизмд эхлээд микролитр хавтангийн нүхэнд цитокины өвөрмөц моноклональ эсрэгбиемүүдийг нэмдэг. Дараа нь ажиглагдаж буй хүссэн эсүүдийг худагт нэмнэ. Дараа нь эсийг өсгөвөрлөнө. Эсийн инкубацийн үед эсүүд аливаа өдөөлтөд хариу үйлдэл үзүүлж, цитокин ялгаруулдаг. Өсгөвөрлөсөн эсүүдээс ялгарсан цитокинууд нь эсүүд цитокины өвөрмөц моноклональ эсрэгбиемүүдээр хүрээлэгдсэн тул эсрэгбиемүүдэд наалдана.
Зураг 02: Элиспотын шинжилгээ
Эдгээр цитокины өвөрмөц моноклональ эсрэгбиемүүдийг илрүүлэхийн тулд биотинжүүлсэн өвөрмөц илрүүлэх эсрэгбиемүүдийг худагт нэмнэ. Биотинжуулсан өвөрмөц илрүүлэх эсрэгбие нь цооног дахь цитокины өвөрмөц моноклональ эсрэгбиемүүдийг барьж авдаг. Түүнчлэн илрүүлэгч эсрэгбиемүүдийг холбохын тулд стрептавидин-ферментийн коньюгатуудыг нүхэнд нэмдэг. Эцсийн шатанд тусгай субстратыг худагт нэмнэ. Ферментийн коньюгат ба субстратын урвалын үр дүнд нүхэнд тодорхой толбо үүсдэг. Эдгээр ялгаатай цэгүүдийг автоматжуулсан ELISpot уншигч дээр уншдаг. Эцэст нь энэ нь цитокины шүүрлийн давтамжийг тооцоолох болно.
Элиса болон Элиспот хоёрын ижил төстэй зүйл юу вэ?
- Энэ нь хоёулаа ферменттэй холбоотой дархлаа шингээх сорил юм.
- Хоёр шинжилгээ хоёулаа тодорхой уургийн аналитийг илрүүлдэг.
- Эдгээр шинжилгээнд уургийн аналитийг тодорхойлохын тулд тусгай эсрэгбиемүүдийг ашигладаг.
- Хоёр шинжилгээнд фермент болон субстрат ашигладаг.
- Эдгээрийг эмнэлгийн лабораторид оношлогооны хэрэгсэл болгон ашигладаг.
Элиса ба Элиспот хоёрын ялгаа юу вэ?
Элиса бол нууцлагдсан дохионы уургийн нийт концентрацийг тодорхойлдог ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ юм. Нөгөөтэйгүүр, Элиспот нь цитокин ялгаруулдаг эсийг хэмждэг ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ юм. Тэгэхээр энэ бол Элиза ба Элиспот хоёрын гол ялгаа юм. Түүнчлэн, Элизагийн сорилын үед антигенийг эхлээд микролитрийн нүхэнд хөдөлгөөнгүй болгодог. Үүний эсрэгээр, Элиспотын сорилын үед эсрэгбиемийг эхлээд микролитрийн нүхэнд хөдөлгөөнгүй болгодог. Тиймээс энэ нь Элиза болон Элиспот хоёрын өөр нэг ялгаа юм.
Доорх инфографик нь Элиза болон Элиспот хоёрын ялгааны нарийвчилсан шинжилгээг хүснэгт хэлбэрээр үзүүлэв.
Хураангуй – Элизагийн эсрэг Элиспот
Элиса ба Элиспот нь анагаах ухаан, ургамлын эмгэг судлал, биотехнологи, эмийн үйлдвэрлэлийн янз бүрийн салбарт өргөн хэрэглэгддэг ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ юм. Элиза нь шингэний дээжинд лиганд (уураг) байгаа эсэхийг хэмжиж буй лиганд эсрэг чиглэсэн эсрэгбиемүүдийг ашиглан илрүүлдэг. Элиспотын шинжилгээ нь дархлааны хариу урвалыг хянах өргөн хэрэглэгддэг арга юм. Энэ нь эсрэгбие ашиглан бие даасан цитокин ялгаруулдаг эсийг илрүүлдэг. Энэ нь дархлаа судлалын болон био шинжилгээний арга юм. Ийнхүү Элиза болон Элиспотын ялгааг тоймлон хүргэж байна.
