Цутгах хавтан ба Өргөх хавтангийн гол ялгаа нь дээжийн тодорхой эзэлхүүнийг тараасан хавтан дахь агарын гадаргуу дээр тарааж, цутгах хавтан дээр тодорхой хэмжээний дээжийг холих явдал юм. агар, дараа нь таваг руу хийнэ. Эдгээр хоёр аргын нарийвчлалыг харьцуулахдаа цутгах хавтан нь тархсан хавтангаас өндөр нарийвчлалтай байна.
Стандарт хавтан тоолох арга нь дээж доторх амьд (ургах/ургах/ургах чадвартай) бичил биетний тоог тоолох өсөлтөд суурилсан арга юм. Энэ нь амьд бичил биетний тоог шинжлэхэд олон микробиологийн салбарт ашигладаг хүчирхэг арга юм. Хүнс, сүүн бүтээгдэхүүн, анагаах ухаан, байгаль орчин, усан ба хөдөө аж ахуй, бичил биетний генетик, молекул микробиологи, өсөлтийн медиа хөгжүүлэлт, биотехнологи (биореакторын технологи, исгэх, хаягдал / бохир ус цэвэрлэх гэх мэт) зэрэг салбаруудад энэ аргыг ашигладаг. Цаашилбал, стандарт таваг тоолох хоёр үндсэн арга байдаг: Spread plate техник болон Pour plate техник.
Pour Plate гэж юу вэ?
Цутгах хавтан техник нь дээжинд байгаа зарим амьдрах чадвартай эсийг тоолох бичил биетний арга юм. Цутгах хавтангийн аргын онцлог нь дээжийн мэдэгдэж буй эзэлхүүнийг эхлээд агартай хольж, дараа нь таваг руу хийнэ.
Зураг 01: Цутгах таваг
Бусад алхмууд нь дараагийн хэсэгт авч үзэх хавтан тараах техниктэй төстэй. Дээжтэй хольсон агарыг асгасны дараа хийх дараагийн алхам бол түүнийг хатууруулах, өсгөвөрлөх явдал юм. Инкубацийн дараа 1 г эсвэл 1 мл-ийн эцсийн CFU-ийг тооцоолохын тулд амьдрах чадвартай колонийн тоог тоолох шаардлагатай.
Spread Plate гэж юу вэ?
Spread plate гэдэг нь дээжинд амьдрах чадвартай эсийг тоолох арга юм. Энэ аргын хувьд дор хаяж нэг нь тоолж болохуйц тооны колони үүсэхийг баталгаажуулахын тулд дээжийг цуваа шингэлэх шаардлагатай. Энд байгаа процесс нь агарын хавтангийн гадаргуу дээр тогтоосон хэмжээний шингэрүүлэлтийг пипип хийж, архины дөлөөр шатааж, хөргөсөн шилэн тараагчаар агарын гадаргуу дээр хурдан жигд тараах явдал юм. Найдвартай дундаж утгыг олж авахын тулд хуулбарыг хийх шаардлагатай. Дараагийн алхам нь эдгээр ялтсуудыг богино хугацаанд хатааж, дараа нь ургуулахад тохиромжтой температур болон тогтоосон инкубацийн хугацаанд эргүүлж инкубаторт хийнэ.
Зураг 02: Өргөх хавтан
Инкубацийн дараа ялтсуудыг шалгаж үзэхэд өсөлтийг харуулна. Нэг буюу хэд хэдэн шингэрүүлэлтийн үед тарилгад агуулагдах эсийн тоо (жишээлбэл, 100 эсвэл 200 мкл) агарын гадаргуу дээр 30-300 салангид колони үүсгэдэг. 30-аас бага колони тоолох нь статистикийн хувьд найдваргүй юм. 300-аас дээш тоонуудыг тоолоход хэцүү бөгөөд алдаа гарах магадлалтай.
Цутгах таваг ба тараах таваг хоёрын хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- Талхсан хавтан ба цутгах хавтан нь дээжинд байгаа амьдрах чадвартай эсийн тоог гаргах хоёр арга юм.
- Хоёулаа шууд урагшлах аргууд.
- Түүвэрлэлтийн алдаа нь хоёр аргад тохиолдож болно.
- Өсөлтийн нөхцөлийн хязгаарлалт нь хоёр аргын үр дүнд нөлөөлдөг.
- Техникийн алдаа нь хоёр аргын эцсийн үр дүнд саад учруулж болзошгүй.
- Хэдийгээр амьдрах чадвартай боловч өсгөвөрлөх боломжгүй бактерийг үржүүлэхэд энэ хоёр аргыг ашигладаггүй.
Цутгах таваг ба тараах таваг хоёрын ялгаа юу вэ?
Цутгах хавтан нь дээжинд хэд хэдэн амьдрах чадвартай эсийг тоолох бичил биетний арга юм. Spread plate техник нь зөөвөрлөгчийн гадаргуу дээр ургасан бактерийг тоолох өөр нэг арга юм. Цутгах тавагны техникт дээжийг цутгах хавтан дээрх хатуурсан дундаж гадаргуу дээр нэмэх үйл явц юм. Гэхдээ спред хавтангийн техникт дээжийг хайлсан агартай хольж, дараа нь таваг руу хийнэ.
Энэ хоёр аргын нарийвчлалын хувьд цутгах хавтан нь тархсан хавтангаас өндөр нарийвчлалтай байдаг. Түүгээр ч зогсохгүй, цутгах тавагнаас ялгаатай нь дээжийг тараасан хавтан дээр жигд тараахын тулд шилэн тараагчийг ашигладаг. Цаашилбал, цутгах хавтанг ашиглан аэроб, анаэроб, факультатив анаэробыг тоолж болно. Гэсэн хэдий ч тархсан хавтанг ашиглан зөвхөн аэробыг тоолох боломжтой. Цаашилбал, тараах хавтанг хийхэд хатуужсан агар хавтан шаардлагатай бол цутгах аргад шингэн хайлсан агарын орчин шаардлагатай.
Товч мэдээлэл – Цутгах таваг ба Өргөх хавтан
Pour plate болон Spread plate нь дээжинд байгаа бичил биетний эсийг тоолоход хялбар болгох микробиологийн хоёр арга юм. Хоёр арга хоёулаа өсөлтөд суурилсан тул амьдрах чадвартай эсийг хэмжинэ. Цутгах явцад тодорхой хэмжээний дээжийг хайлсан агартай хольж, хавтан руу хийнэ. Тархалтын явцад хатуурсан агар орчны гадаргуу дээр мэдэгдэж буй эзэлхүүнийг тараана. Энэ нь асгах таваг ба тараах таваг хоёрын ялгаа юм.
