FISH болон CGH-ийн гол ялгаа нь FISH нь флюресцентээр хаяглагдсан датчик ашиглан хромосом дээрх тодорхой ДНХ-ийн дарааллыг илрүүлдэг молекулын арга бөгөөд CGH нь геномын ДНХ-ийн өөрчлөлтийг илрүүлдэг молекул цитогенетикийн өөр нэг арга юм.
Цитогенетик шинжилгээ нь аневлоид, делеци, давхардал, дахин зохион байгуулалт гэх мэт хромосомын эмгэгийг илрүүлэхэд анагаах ухаанд чухал үүрэг гүйцэтгэдэг. Хромосомын эмгэгүүд нь эцэстээ хорт хавдар, үргүйдэл, Дауны хам шинж, Клайнфелтерийн хам шинж зэрэг удамшлын өвчинд хүргэдэг. хам шинж, лейкеми гэх мэт дээр дурдсан согог, өвчнийг илрүүлэх янз бүрийн молекул цитогенетик аргууд байдаг. Тэдгээрийн дотроос FISH (флюресцент in situ эрлийзжүүлэх) ба CGH (харьцуулсан геномын эрлийзжүүлэх) хоёр хүчирхэг эрлийзжүүлэх арга юм. Гэсэн хэдий ч энэ хоёр арга нь сайн болон сул талуудтай.
Загас гэж юу вэ?
FISH нь эд эсийн нэг хэсэг эсвэл хэсэг, бүхэл бүтэн эд эсэд хийгддэг нуклейн хүчлийг эрлийзжүүлэх арга юм. Энэ нь датчик дээр суурилсан арга юм. Энэхүү техник нь Уотсон Крикийн нэмэлт суурь хосолсон онолоос шалтгаалснаар ДНХ – ДНХ-ийн эрлийз эсвэл ДНХ – РНХ-ийн эрлийз аль нэгийг бий болгодог бөгөөд ингэснээр мутацид орсон генийг илрүүлэх эсвэл сонирхсон генийг тодорхойлох боломжтой. Цаашилбал, энэ техник нь нэг судалтай ДНХ-ийн дараалал, хоёр хэлхээтэй ДНХ-ийн дараалал, нэг судалтай РНХ дараалал эсвэл синтетик олигонуклеотидыг сонирхож буй генийн дараалалд нэмэлт датчик болгон ашигладаг. Нэмж дурдахад, энэ аргын хамгийн чухал шинж чанар бол флюресцент будагч бодис бүхий датчикийг шошголох явдал юм. Тиймээс зондууд нь хромосомын нэмэлт хэсгүүдтэй холбогдож, илрүүлэхэд хялбар болгодог.
Түүнээс гадна FISH бол маш мэдрэмтгий, өвөрмөц арга юм. Тиймээс энэ нь гематологийн хорт хавдар, хатуу хавдрын судалгаа, оношлогоонд түгээмэл хэрэглэгддэг арга юм. Гэхдээ FISH нь нягтрал багатай байдаг. Энэ нь мөн датчикийн дарааллыг төлөвлөхөд зорилтот хэвийн бус байдлын талаар урьдчилан мэдлэгтэй байхыг шаарддаг.
Зураг 01: ЗАГАС
Халдварт өвчний молекул оношилгоонд голчлон эмгэг төрүүлэгч байгаа эсэхийг тодорхойлох, молекулын оношилгоогоор эмгэг төрүүлэгчийг баталгаажуулах зорилгоор ЗАГАС-ийн хэрэглээ олон байдаг. Түүнчлэн, FISH бол хөгжлийн биологи, кариотип, филогенетик шинжилгээ, хромосомын физик зураглал зэрэгт түгээмэл хэрэглэгддэг арга юм.
CGH гэж юу вэ?
Харьцуулсан геномын гибридизаци (CGH) нь геномын ДНХ-ийн дарааллын өөрчлөлтийг илрүүлэх боломжтой ДНХ дээр суурилсан молекул цитогенетикийн өөр нэг арга юм. Энэ арга нь геномын ДНХ-ийн дараалал дахь өөрчлөлт, өөрчлөлтийг илрүүлэхийн тулд хромосом болон генийн өөрчлөлтийг шинжлэх боломжтой дэвшилтэт арга юм. Цаашилбал, CGH нь туршилтын дээж болон лавлагааны дээжээс ДНХ-ийг тусгаарлах, хуваахыг шаарддаг. Дараа нь дээжийг хоёр өөр флюресцент будаг (ихэвчлэн улаан, ногоон) ашиглан шошголох ёстой. Дараа нь хоёр дээжийг хольж, өрсөлдөх чадвартай эрлийзжүүлэхийг зөвшөөрдөг. Эцсийн алхам бол генийн давхардал, генийн алдагдал гэх мэт ДНХ-д гарсан өөрчлөлтийг илрүүлэх дээжийг шинжлэх явдал юм. Ялангуяа туршилтын дээж болон хяналтын дээжийн ДНХ хуулбарын тооны зөрүүг хэмждэг.
Зураг 02: CGH
CGH-ийн өөр хувилбар одоо бэлэн боллоо; энэ нь ердийн ИНХ-ээс илүү дэвшилтэт арга юм. Энэ нь массив дээр суурилсан CGH эсвэл aCGH гэж нэрлэгддэг техник юм. aCGH нь нэг туршилтаар олон мянган дарааллын ген эсвэл дарааллын устгалыг нарийн тодорхойлох боломжийг олгодог.
FISH болон CGH хоёрын ижил төстэй зүйл юу вэ?
- FISH болон CGH нь хоёр молекул арга юм.
- FISH болон CGH хоёулаа нуклейн хүчлийн эрлийзжилтээс хамаардаг.
- Мөн энэ хоёр техникт ДНХ-ийн тодорхой зорилтуудыг илрүүлэхийн тулд зохион бүтээсэн датчик шаардлагатай.
- Бид тэдгээрийг удамшлын өвчнийг төрөхийн өмнөх болон төрсний дараах оношлоход ашигладаг.
- Цаашилбал, FISH болон CGH хоёулаа геномын өөрчлөлтийг судлах маш хүчирхэг хэрэгсэл юм.
- Тэд датчикийг шошголохдоо флюресцент будагч бодис ашигладаг.
FISH болон CGH хоёрын ялгаа юу вэ?
FISH нь тодорхой ДНХ-ийн дарааллыг илрүүлэхийн тулд флюресцент датчикийг ашигладаг in situ эрлийзжүүлэх процедур бөгөөд CGH нь геномын ДНХ-ийн дарааллын өөрчлөлтийг илрүүлдэг молекул эрлийзжүүлэх арга юм. Энэ бол FISH болон CGH хоёрын гол ялгаа юм.
Түүгээр ч зогсохгүй FISH нь датчикийн дарааллыг зохиохын тулд зорилтот хэвийн бус байдлын талаар урьдчилан мэдлэгтэй байхыг шаарддаг бол CGH нь урьдчилсан мэдлэг шаарддаггүй. Мөн FISH болон CGH хоёрын өөр нэг ялгаа нь FISH нь хязгаарлагдмал нарийвчлалтай байхад aCGH өндөр нягтаршилтай байдаг.
Доорх инфографик нь FISH болон CGH-ийн ялгааг нэгтгэн харуулав.
Тойм – FISH vs CGH
FISH болон CGH нь сонирхолтой генийн дарааллыг илрүүлэхэд тусалдаг молекул цитогенетикийн хоёр арга юм. FISH нь флюресцентээр тэмдэглэсэн датчик ашиглан хромосом дээрх тодорхой ДНХ-ийн дарааллыг илрүүлэхэд тусалдаг бол CGH нь геномын ДНХ-ийн өөрчлөлтийг илрүүлэхэд тусалдаг. Энэ бол FISH болон CGH хоёрын гол ялгаа юм.