Өрсөлдөх чадвартай болон өрсөлдөх чадваргүй ELISA-ийн гол ялгаа нь өрсөлдөх чадвартай ELISA нь дарангуйлах эсрэгтөрөгч ашигладаг бол өрсөлдөх чадваргүй ELISA нь дарангуйлах эсрэгтөрөгч ашигладаггүй явдал юм.
Ферменттэй холбоотой иммуносорбентын шинжилгээ (ELISA) нь эсрэгбие, эсрэгтөрөгч, уураг, гликопротейн зэрэг янз бүрийн зорилтуудыг илрүүлдэг дархлаа судлалын шинжилгээ юм. Энэ нь гүйцэтгэхэд хялбар бөгөөд хурдан арга юм. Тиймээс үүнийг судалгаа, оношлогооны зорилгоор ихэвчлэн ашигладаг. ELISA нь ферментийг ашиглах, эсрэгбие болон эсрэгтөрөгчийг тусгайлан холбоход оршино. Урвал хэрхэн явагддагаас хамааран ELISA-ийн дөрвөн төрөл байдаг: шууд ELISA, шууд бус ELISA, сэндвичний ELISA, дарангуйлах ELISA. Шууд, шууд бус болон сэндвичээр хийсэн ELISA нь өрсөлдөх чадваргүй ELISA-ийн төрөл бөгөөд дарангуйлах ELISA нь бүрэн гүйцэд ЭЛИЗА-ийн төрөл юм. Энэ нийтлэлийн гол зорилго нь өрсөлдөх чадвартай ба өрсөлдөхгүй ЭЛИЗА-ийн ялгааг хэлэлцэх явдал юм.
Өрсөлдөөнт ЭЛИЗА гэж юу вэ?
Өрсөлдөөнт ELISA нь дохионы хөндлөнгийн оролцоог илрүүлэх замаар дээж дэх эсрэгтөрөгчийн концентрацийг хэмждэг. Энд шинжилгээнд дарангуйлагч эсрэгтөрөгчийг ашигладаг. Тиймээс энэ нь ELISA-г дарангуйлах нэг төрөл юм. Уг процедурын явцад дээжинд агуулагдах антиген нь тодорхой хэмжээний шошготой эсрэгбиетэй холбогдохын тулд сонгосон лавлагааны эсрэгтөрөгчтэй өрсөлддөг. Цаашилбал, энэ процедур нь дээжийг инкубаци хийх, шошготой эсрэгбиеийн илүүдэл хэмжээгээр эхэлдэг. Мөн лавлагааны эсрэгтөрөгчийг олон худгийн шинжилгээний хавтан дээр урьдчилан бүрсэн байх ёстой. Дараа нь дээжийн хольцыг лавлагааны эсрэгтөрөгч агуулсан шинжилгээний хавтан дээр нэмнэ. Чөлөөт эсрэгбие нь дээж дэх эсрэгтөрөгчийн хэмжээнээс хамаарч лавлагаа эсрэгтөрөгчтэй холбогдоно. Тиймээс хэрэв дээжийн эсрэгтөрөгч их байвал лавлагааны эсрэгтөрөгч бага илрэх болно. Тиймээс энэ нь илүү сул дохио үүсгэдэг.
Зураг 01: ELISA
Харин, дээжинд бага хэмжээний эсрэгтөрөгч агуулагдах үед илүү олон лавлагаа антиген эсрэгбиемүүдийг эзэлж хүчтэй дохио өгнө. Өрсөлдөх чадвартай ELISA нь дээжинд бага хэмжээний эсрэгтөрөгч агуулсан үед илүү хүчтэй дохио өгдөг тул өрсөлдөх чадвартай ELISA нь цөөн тооны эсрэгтөрөгчтэй дээжүүдэд ч маш мэдрэмтгий шинжилгээ юм.
Зарим өрсөлдөх чадвартай ELISA иж бүрдэлд шошготой эсрэгбиеийн оронд шошготой эсрэгтөрөгч хэрэглэдэг. Энд шошготой эсрэгтөрөгч болон дээжийн эсрэгтөрөгч нь анхдагч эсрэгбиемтэй холбогдохын тулд өрсөлдөх болно. Үүний нэгэн адил, дээж дэх эсрэгтөрөгчийн хэмжээ бага байх үед эсрэгбиетэй холбогддог шошготой эсрэгтөрөгчийн хэмжээ өндөр болж, илүү хүчтэй дохио үүсгэдэг.
Өрсөлдөөнгүй ELISA гэж юу вэ?
Дөрвөн төрлийн ELISA-ийн гурван төрөл нь өрсөлдөх чадваргүй ELISA юм. Эдгээр нь шууд ELISA, шууд бус ELISA, сэндвичний ELISA юм. Бүх гурван формат нь арга зүйн хувьд бага зэрэг ялгаатай ELISA-ийн нийтлэг зарчмын дагуу ажилладаг.
Шууд ELISA нь анхдагч эсрэгбие гэж шошготой ферментийг ашигладаг. Тиймээс энэ нь хоёрдогч эсрэгбие шаарддаггүй. Тиймээс шууд ELISA нь бусад төрлийн ELISA-аас хурдан байдаг. Анхдагч эсрэгбие нь хавтанд байгаа хөдөлгөөнгүй зорилтот эсрэгтөрөгчтэй шууд холбогддог. Тиймээс фермент-субстратын урвал явагдаж, харагдах дохиог бий болгоно.
Зураг 02: Сэндвич ELISA
Шууд ELISA-аас ялгаатай нь шууд бус ELISA нь шошгогүй анхдагч эсрэгбие болон хоёрдогч эсрэгбие гэж тэмдэглэгдсэн ферментийг ашигладаг. Анхдагч эсрэгбие нь хөдөлгөөнгүй эсрэгтөрөгчтэй холбогдонгуут хоёрдогч эсрэгбие нь анхдагч эсрэгбиетэй холбогддог. Хоёрдогч эсрэгбие дэх фермент нь эсрэгтөрөгчтэй урвалд орж, харагдахуйц дохио үүсгэдэг. Сэндвичний ELISA нь шууд болон шууд бус ELISA-аас ялгаатай. Энд эсрэгбие нь шинжилгээний хавтангийн хананд бэхлэгддэг.
Өрсөлдөх чадвартай болон өрсөлдөхгүй ЭЛИЗА-ийн хооронд ямар ижил төстэй зүйл байдаг вэ?
- Өрсөлдөх чадвартай ба өрсөлдөхгүй ELISA нь хоёр төрлийн дархлал шингээгч шинжилгээний арга юм.
- Эдгээр нь маш уян хатан, мэдрэмтгий техник юм.
- Цаашилбал, өрсөлдөх чадвартай болон өрсөлдөх чадваргүй ELISA нь ферменттэй холбоотой дархлааны шинжилгээ юм.
- Мөн энэ хоёр арга нь фермент-субстратын урвалын улмаас дохио үүсгэдэг.
Өрсөлдөх чадвартай ба өрсөлдөхгүй ELISA-ийн ялгаа нь юу вэ?
Өрсөлдөөнт ЭЛИЗА нь тодорхой эсрэгбиеийн хязгаарлагдмал хэмжээгээр задлан шинжилж буй антиген болон шошготой эсрэгтөрөгчийн хооронд бүрэн гүйцэд тогтдог ELISA-ийн нэг төрөл юм. Нөгөөтэйгүүр, өрсөлдөх чадваргүй ELISA дахь сонирхлын эсрэгтөрөгч ба лавлагааны эсрэгтөрөгчийн хооронд ийм өрсөлдөөн байдаггүй. Тиймээс энэ нь өрсөлдөх чадвартай ба өрсөлдөхгүй ELISA-ийн гол ялгаа юм. Үүний нэгэн адил, өрсөлдөх чадвартай ELISA нь ELISA-г дарангуйлдаг бол өрсөлдөхгүй ELISA нь дарангуйлдаг ELISA биш юм. Тэгэхээр энэ нь өрсөлдөх чадвартай ба өрсөлдөхгүй ELISA-ын ялгаа юм.
Түүгээр ч зогсохгүй өрсөлдөх чадвартай ELISA нь сонирхол татахуйц бага хэмжээний эсрэгтөрөгчийг хэмжихэд илүү тохиромжтой. Энэ бол эмзэг арга юм. Нөгөөтэйгүүр, өрсөлдөх чадваргүй ELISA нь дээжинд агуулагдах эсрэгтөрөгчийн тооноос хамаардаггүй. Тиймээс энэ нь өрсөлдөх чадвартай болон өрсөлдөхгүй ELISA-ийн ялгаа юм.
Доорх инфографик нь өрсөлдөх чадвартай болон өрсөлдөх чадваргүй ELISA-ийн ялгааг харьцуулан тайлбарлав.
Хураангуй – Өрсөлдөх чадвартай ба Өрсөлдөөнгүй ЭЛИЗА
Өрсөлдөх чадвартай ба өрсөлдөхгүй ЭЛИЗА нь ЭЛИЗА буюу ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээний хоёр үндсэн төрөл юм. Өрсөлдөх чадвартай болон өрсөлдөх чадваргүй ELISA-ийн ялгааг нэгтгэн дүгнэхэд, өрсөлдөх чадвартай ELISA нь ашиг сонирхлын эсрэгтөрөгч ба лавлагааны эсрэгтөрөгчийн хязгаарлагдмал хэмжээний эсрэгбиеийн хоорондох өрсөлдөөнд тулгуурладаг. Тиймээс өрсөлдөх чадвартай ELISA-г дарангуйлах ELISA гэж бас нэрлэдэг. Нөгөөтэйгүүр, өрсөлдөх чадваргүй ELISA нь зорилтот антиген ба лавлагааны эсрэгтөрөгчийн хоорондох өрсөлдөөнд тулгуурладаггүй. Энэ нь сонирхож буй аналитийн эсрэг шошготой тусгай эсрэгбиеийн илүүдэлийг ашигладаг. Тиймээс энэ нь өрсөлдөх чадвартай ба өрсөлдөхгүй ELISA-ийн гол ялгаа юм. Шууд ELISA, шууд бус ELISA, сэндвичний ELISA нь өрсөлдөх чадваргүй ELISA-ийн үндсэн гурван төрөл юм.
