Радио-иммун шинжилгээний шинжилгээ ба иммуноррадиометрийн шинжилгээний гол ялгаа нь радиоиммунологийн шинжилгээнд хэмжигдэх дээж эсвэл нэгдэл нь хослолын өмнө цацраг идэвхт эсрэгтөрөгчтэй нэгддэг бол иммунорадиометрийн шинжилгээнд дээж эсвэл нэгдэл нь цацраг идэвхт шинж чанартай шууд нийлдэг. эсрэгбие.
Дархлааны шинжилгээ гэдэг нь эсрэгбие эсвэл эсрэгтөрөгч ашиглан уусмал дахь макромолекул байгаа эсэх, концентрацийг илрүүлэх биохимийн шинжилгээ юм. Дээж дэх эсрэгтөрөгчийг хэмжихийн тулд флюресцент ба цацраг идэвхт эсрэгбиемүүдийг ашигладаг. Эхэндээ эсрэгбиемүүдийг сийвэнгийн уургийн шинжилгээнд зориулж дархлалын тунадасжуулах, дархлаа сулруулах, дархлаа-электрофорез гэх мэт тунадасжуулах аргад ашигласан. Одоогийн байдлаар эм, хавдрын маркер, гормоныг хэмжихэд радиоиммунологийн шинжилгээ, иммунорадиометрийн шинжилгээ зэрэг маш мэдрэмтгий аргуудыг ашиглаж байна.
Radioimmunoassay Assay гэж юу вэ?
Radioimmunoassay (RIA) нь цацраг идэвхт элементүүдийг ашиглан эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолборыг үе шаттайгаар үүсгэдэг дархлааны шинжилгээ юм. RIA нь дээжинд байгаа эсрэгтөрөгчийн хэмжээг илрүүлэхийн тулд ихэвчлэн цацраг идэвхт эсрэгбие ашигладаг. RIA нь маш өвөрмөц бөгөөд маш мэдрэмтгий in vitro шинжилгээ юм. RIA-ийн цаадах зарчим нь өрсөлдөөнт хүчинтэй байх явдал юм. Энд цацраг идэвхт эсрэгтөрөгч нь тогтмол хэмжээний эсрэгбие эсвэл рецепторыг холбох газруудын төлөө цацраг идэвхт бус эсрэгтөрөгчтэй өрсөлддөг. Цацраг идэвхт бодис ашигладаг тул РИА нь тусгай зөвшөөрөл, урьдчилан сэргийлэх арга хэмжээ шаарддаг бөгөөд энэ нь хамгийн хямд техникүүдийн нэг хэвээр байна.
Зураг 01: Дархлааны шинжилгээ
РИА-ийн үед тодорхой хэмжээний эсрэгтөрөгчийг тирозинд хавсаргасан иодын гамма-цацраг идэвхт изотопоор тэмдэглэснээр цацраг идэвхт бодис байнга гардаг. Дараа нь энэ эсрэгтөрөгчийг тодорхой хэмжээний эсрэгбиетэй нэгтгэдэг. Энд эсрэгтөрөгч ба эсрэгбие хоёулаа бие биетэйгээ тусгайлан холбогддог. Дараа нь тусгай эсрэгбие бүхий ийлдэс дэх шошготой эсрэгтөрөгч болон шошгогүй эсрэгтөрөгчийн хооронд өрсөлдөөнт урвалыг эхлүүлэхийн тулд цусны ийлдсийн дээжийг нэмнэ. Энэ урвалын үед эсрэгбие нь тодорхой хэмжээний шошготой эсрэгтөрөгчийг ялгаруулдаг. Энэ хэмжээ нь шошготой ба шошгогүй эсрэгтөрөгчийн харьцаатай пропорциональ байна. Эцэст нь өвчтөний цусны ийлдэс дэх эсрэгтөрөгчийн хэмжээг гаргахын тулд холбох муруй үүсдэг.
Иммунорадиометрийн шинжилгээ гэж юу вэ?
Immunoradiometric assay (IRMA) нь цацрагаар тэмдэглэгдсэн эсрэгбие ашигладаг дархлааны шинжилгээ юм. IRMA-д эсрэгбиемүүдийг радиоизотоп ашиглан тэмдэглэдэг. Эдгээр эсрэгбие нь тодорхой дээжинд агуулагдах эсрэгтөрөгчтэй холбогддог. Эерэг дээжинд цацраг идэвхт шошготой эсрэгбие нь эсрэгтөрөгчийн чөлөөт эпитопуудтай холбогддог. Энэ нь эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор үүсгэдэг.
Хоёр дахь урвалын үед холбоогүй байгаа шошготой эсрэгбиемүүдийг хатуу фазын эсрэгтөрөгч ашиглан устгана. Уусмал дахь цацраг идэвхт эсрэгбиеийн үлдсэн тоо нь эсрэгтөрөгчийн концентрацаас шууд хамааралтай байдаг. IRMA нь илүү их хэмжээний цацрагаар тэмдэглэгдсэн эсрэгбиеийг урвалж болгон ашигладаг илүүдэл урвалжийн шинжилгээ гэж нэрлэдэг. Энд шошготой эсрэгбие эсвэл эсрэгтөрөгчийн илүүдэл концентрацийг урвалд оруулахыг зөвшөөрдөг. Эцсийн шатанд эсрэгтөрөгчтэй холбогдсон ба чөлөөт эсрэгбиемүүдийг ялгаж, эсрэгтөрөгчтэй холбоотой фракцыг цацраг идэвхт шинжилгээнд хамруулдаг. Энд фракцийн идэвхжил нь эсрэгтөрөгчийн концентрацтай шууд пропорциональ байна.
Radioimmunoassay болон Immunoradiometric Assay хоёрын ижил төстэй зүйл юу вэ?
- Радиоиммунологийн шинжилгээ болон иммунорадиометрийн шинжилгээ хоёулаа эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолборыг үе шаттайгаар бүрдүүлэхэд цацраг идэвхт элементүүдийг ашигладаг дархлаа судлалын шинжилгээ юм.
- Тэдгээр нь эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор үүсгэдэг.
Радиоиммунологийн шинжилгээ ба иммунорадиометрийн шинжилгээний хооронд ямар ялгаа байдаг вэ?
Radioimmunoassay нь радиоизотопоор тэмдэглэсэн эсрэгтөрөгчөөр эсрэгбиеийн түвшинг тодорхойлдог дархлааны шинжилгээ бөгөөд иммунорадиометрийн шинжилгээ нь цацраг идэвхт шошготой эсрэгбиеийн илүүдэл концентрацийг ашигладаг урвалжийн илүүдэл шинжилгээ юм. Тиймээс энэ нь радиоиммун шинжилгээний болон иммунорадиометрийн шинжилгээний гол ялгаа юм. IRMA нь RIA-аас илүү өндөр мэдрэмжийг өгөх чадвартай. RIA-д эсрэгтөрөгчийг иодын гамма-цацраг идэвхит изотопоор тэмдэглэсэн бол IRMA эсрэгбиемүүдэд иодын изотопыг ашиглан шошголодог. Тиймээс энэ нь мөн радиоиммун шинжилгээ ба иммунорадиометрийн шинжилгээний ялгаа юм. IRMA нь урвалжийн илүүдэл техник тул шинжилгээг RIA-аас богино хугацаанд хийдэг.
Дараах хүснэгтэд радиоиммунологийн шинжилгээ ба иммунорадиометрийн шинжилгээний ялгааг нэгтгэн харуулав.
Хураангуй – Радиоиммун шинжилгээ ба иммунорадиометрийн шинжилгээ
Radioimmunoassay нь эсрэгбиеийн түвшинг тодорхойлохын тулд цацраг идэвхт элементүүдийг үе шаттайгаар үүсгэдэг дархлааны шинжилгээ юм. РИА ихэвчлэн цацраг идэвхт эсрэгбие хэрэглэдэг. Цацраг идэвхт эсрэгтөрөгч нь тогтмол хэмжээний эсрэгбие эсвэл рецепторыг холбох газруудын төлөө цацраг идэвхт бус эсрэгтөрөгчтэй өрсөлддөг. Иммунорадиометрийн шинжилгээ нь дээжийн эсрэгтөрөгчийн түвшинг цацрагаар тэмдэглэсэн эсрэгбие ашиглан тодорхойлох дархлааны шинжилгээ юм. Эдгээр эсрэгбие нь тодорхой дээжинд агуулагдах эсрэгтөрөгчтэй холбогддог. Шинжилгээ бүрийн төгсгөлд эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолбор үүсдэг. Шинжилгээний үр дүнг авахын тулд холбох муруйг зурна. Радиоиммун шинжилгээнд тэмдэглэсэн эсрэгтөрөгчийн тоо хэмжээ нь шошготой болон шошгогүй эсрэгтөрөгчийн харьцаатай пропорциональ байдаг бол иммунорадиометрийн шинжилгээнд эсрэгтөрөгчтэй холбоотой фракцын идэвхжил нь эсрэгтөрөгчийн концентрацтай шууд пропорциональ байна. Энэ бол радиоиммуноассэй ба иммунорадиометрийн шинжилгээний ялгааны хураангуй юм.
