Дархлааны тунадасжилт ба коиммунопреципитацийн гол ялгаа нь иммунопреципитаци нь тодорхой эсрэгбие ашиглан уусмалаас уураг тунадасжуулах арга бөгөөд харин коиммунопреципитаци нь тодорхой эсрэгбие ашиглан уусмалаас бүрэн бүтэн уургийн цогцолборыг тунадасжуулах арга юм.
Антиген-эсрэгбиеийн харилцан үйлчлэл нь дархлааны урвалын үед В эсүүд болон эсрэгтөрөгч (уураг)-аас үүссэн эсрэгбие хоорондын тодорхой химийн харилцан үйлчлэл юм. Ер нь уусдаг эсрэгтөрөгч нь уусдаг температур ба рН-ийн электролитийн дэргэд уусдаг эсрэгбиетэй нийлж уусдаггүй харагдах цогцолбор үүсгэдэг. Үүнийг хур тунадасны урвал гэж нэрлэдэг. Тиймээс иммунопреципитаци болон коиммунопреципитаци нь эсрэгтөрөгч зэрэг уургийг тодорхойлохын тулд лабораторид тогтмол ашигладаг тунадасны хоёр төрлийн урвал юм.
Дархлааны тунадас гэж юу вэ?
Дархлааны тунадасжилт гэдэг нь тодорхой эсрэгбие ашиглан уусмалаас уургийг тунадасжуулах арга юм. Заримдаа энэ аргыг бие даасан уургийн дархлаажуулалт гэж нэрлэдэг. Дархлааны тунадасжилт нь эсийн лизатаас сонгогдсон уураг тусгаарлахын тулд эсрэгбие ашигладаг. Эсрэгбие нь тодорхой зорилтот уураг буюу эсрэгтөрөгчийг хольцоос цэвэрлэдэг. Эсрэгбие нь уурагтай холбогдож, эсрэгбие-эсрэгтөрөгчийн цогцолборыг дээжээс гаргаж авдаг. Туршилтын тохиргоонд эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн цогцолборыг уураг A/G холбосон агароз эсвэл соронзон бөмбөлгүүдийг ашиглан гаргаж авдаг. Дараа нь бөмбөлгүүдийг угааж, сонирхож буй уураг нь ялгардаг. Дархлаа тунадасжуулах замаар олж авсан цэвэршүүлсэн уураг буюу эсрэгтөрөгчийг ферменттэй холбоотой иммуносорбент шинжилгээ (ELISA) ба вестерн blot (WB) зэрэг олон төрлийн техникээр баталгаажуулдаг.
Зураг 01: Дархлааны тунадас
Цаашилбал, тусгаарлагдсан уураг эсвэл эсрэгтөрөгчийг анхдагч дараалалд суурилсан ферментийн задралын хэв маягийг ашиглан масс спектрометрээр тоолж, тодорхойлж болно. Дархлаа тунадасжуулах туршилтыг эхлүүлэхийн өмнө анхаарах зүйлс байдаг: аргын форматыг сонгох, уураг ба бөмбөлгүүдийг холбох, үндсэн эсрэгбие ба изотипийг зөв сонгох, сөрөг хяналт.
Коиммунопреципитаци гэж юу вэ?
Коиммунопреципитаци нь тодорхой эсрэгбие ашиглан уусмалаас бүрэн бүтэн уургийн цогцолборыг тунадасжуулах арга юм. Коиммунопреципитаци нь ерөнхийдөө илүү том уургийн нэгдлүүдийн нэг болох мэдэгдэж буй уураг (эсрэгтөрөгч)-д чиглэсэн тодорхой эсрэгбиемийг сонгох замаар ажилладаг. Мэдэгдэж буй гишүүнийг тодорхой эсрэгбиемээр онилсноор уургийн цогцолборыг бүхэлд нь уусмалаас гаргаж авах боломжтой. Энэ нь цогцолборын үл мэдэгдэх гишүүдийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Уусмалаас уургийн цогцолборыг татах тухай ойлголтыг заримдаа "доош татах" механизм гэж нэрлэдэг.
Зураг 02: B Хамтарсан тунадас
Коиммунопреципитаци нь уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийг шинжлэхэд ашигладаг хүчирхэг арга юм. Коиммунопреципитацийн гол зорилго нь сонирхож буй уурагтай холбоотой лиганд, кофактор эсвэл дохионы молекул зэрэг харилцан үйлчлэгч түншүүдийг тодорхойлох явдал юм. Нэмж дурдахад, коиммунопреципитаци нь ийлдэс, эсийн лизат, нэгэн төрлийн эд эс эсвэл нөхцөлт тэжээлээс уураг ялгахад ашигладаг үр дүнтэй арга юм.
Дархлааны тунадас болон коиммунопреципитацийн хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- Immunoprecipitation болон coimmunoprecipitation нь тунадасны урвалд суурилсан хоёр төрлийн арга юм.
- Хоёр аргыг хоёуланг нь тодорхой эсрэгбиемээр дамжуулан зорилтот эсрэгтөрөгчийг тодорхойлоход ашиглаж болно.
- Хоёр техник нь эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн харилцан үйлчлэлээс ихээхэн хамаардаг.
- Эдгээрийг эмнэлзүйн лабораторид тогтмол ашигладаг.
Дархлаа ба Хамтарсан тунадас хоёрын ялгаа юу вэ?
Дархлааны тунадасжилт нь тодорхой эсрэгбие ашиглан уусмалаас уураг тунадасжуулах арга бөгөөд коиммунопреципитаци нь тодорхой эсрэгбие ашиглан уусмалаас бүрэн бүтэн уургийн цогцолборыг тунадасжуулах арга юм. Тиймээс энэ нь иммунопреципитаци ба коиммунопреципитацийн гол ялгаа юм. Цаашилбал, иммунопреципитаци нь лабораторид илүү түгээмэл хэрэглэгддэг бол коиммунопреципитаци нь лабораторид түгээмэл хэрэглэгддэггүй.
Доорх инфографик нь иммунопреципитаци болон хавсарсан тунадасжилтын ялгааг зэрэгцүүлэн харьцуулахын тулд хүснэгт хэлбэрээр үзүүлэв.
Хураангуй – Дархлааны тунадас ба Хамтарсан тунадас
Immunoprecipitation болон coimmunoprecipitation нь эсрэгтөрөгч-эсрэгбиеийн харилцан үйлчлэлээс хамаардаг тунадасны урвалд суурилсан хоёр төрлийн арга юм. Дархлаа тунадасжуулах арга нь тодорхой эсрэгбие ашиглан уусмалаас уураг тунадас үүсгэдэг бол коиммунопреципитацийн арга нь тодорхой эсрэгбие ашиглан бүрэн бүтэн уургийн цогцолборыг уусмалаас гаргаж авдаг. Энэ нь иммунопреципитаци болон коиммунопреципитацийн ялгааг нэгтгэн харуулав.
