Микроцөм болон сүүлт одны шинжилгээний гол ялгаа нь микроцөмийн шинжилгээ нь мутагений нөлөөллөөс үүдэлтэй хромосомын гэмтлийг шалгахад чухал байдаг бол сүүлт одны шинжилгээ нь бие даасан эсүүдийн анхдагч ДНХ-ийн гэмтлийг илрүүлэхэд чухал байдаг.
Генотоксик байдлын шинжилгээ нь мутаци болон хромосомын эмгэгийн боломжуудыг үнэлэхэд тусалдаг. Генотоксинд химийн бодис, цацраг туяа орно. Хорт хавдар үүсгэгч, мутаген, тератоген зэрэг нь генотоксины үндсэн ангилал юм. Эдгээр нь цэгийн мутаци, устгал, нэг ба хоёр хэлхээний тасралт, хромосомын гажиг, бичил бөөм үүсэх, ДНХ-ийн засвар, эсийн мөчлөгийн харилцан үйлчлэл зэрэг янз бүрийн гэмтэл үүсгэдэг. Ийм нөхцөл байдал нь олон төрлийн өвчинд хүргэж болзошгүй бөгөөд генотоксик шинж чанар нь эдгээр нөхцлөөс үүсэх болзошгүй хохирлоос сэргийлдэг. Микронуклеусын шинжилгээ ба сүүлт одны шинжилгээ нь генотоксик шинж чанарын шинжилгээний хоёр арга юм.
Micronucleus Assay гэж юу вэ?
Бичил цөмийн шинжилгээ нь мутаген нөлөөллийн үр дагавар болох хромосомын гэмтлийг үнэлэх шинжилгээ юм. Энэ нь ээрэх болон микронуклей үүсгэдэг химийн бодисыг илрүүлэхэд чухал ач холбогдолтой. Микронуклеусын шинжилгээ нь хромосомын бүтэц, үйл ажиллагаанд саад учруулах химийн бодисын тогтвортой байдлын талаарх мэдээллийг өгдөг. Олон тооны хорт хавдар үүсгэгч бодисууд бичил цөмийн шинжилгээнд эерэг байдаг. Шинжилгээний үйл явц нь химийн эмчилгээ, микронуклеат эсийн давтамжийг хэмжихэд оршино. Хэрэв бичил цөмийн эсийн тоо хэвийн бус ихэссэн бол энэ нь химийн бодис нь хромосомын гэмтэл үүсгэдэг гэж дүгнэдэг.
Бичил цөмийн шинжилгээг ихэвчлэн идэвхтэй хуваагддаг эсүүд дээр хийдэг. Тиймээс эритроцитууд болон ясны чөмөгний үүдэл эсүүд нь эсийн хуваагдалаар үүсгэгддэг эдгээр шинжилгээнд хамгийн тохиромжтой нэр дэвшигчид юм. Тэд байнгын, хурдан эргэлтийг мэдэрдэг. Эритроцитууд жинхэнэ цөмгүй байдаг тул шинжилгээний төгсгөлд бичил цөмт эсийг илүү тод харагдуулдаг.
Зураг 01: Микроцөмийн шинжилгээний ажиглалт
Micronucleus шинжилгээ нь хэмнэлттэй, хурдан, тохиромжтой бөгөөд гүйцэтгэхэд бага ур чадвар шаарддаг. Эдгээр нь хромосомын гажигийг найдвартай байдлаар хурдан тусгадаг бөгөөд хромосомын гэмтлийг хурдан үнэлэхэд нэн тустай. Микроцөмийн шинжилгээний тусгай бөгөөд олон талт төрөл бол цитокинезийн блокийн бичил цөмийн цитом (CBMNcyt) шинжилгээ юм. Энэ нь хромосомын гэмтэл, эсийн тогтворгүй байдлыг хэмжихэд илүү тохиромжтой шинжилгээ юм. Гэсэн хэдий ч бичил цөмийн шинжилгээг ашиглахад тулгардаг гол асуудал нь янз бүрийн төрлийн хромосомын гажигийг тодорхойлох боломжгүй байдаг бөгөөд уг шинжилгээ нь митозын хурд болон эсийн үхлийн хувь хэмжээнд нөлөөлж, үр дүнг өөрчлөхөд хүргэдэг.
Сүүлт одны шинжилгээ гэж юу вэ?
Сүүлт одны шинжилгээ нь нэг гель электрофорезийн шинжилгээ гэж нэрлэгддэг бөгөөд ДНХ-ийн гэмтлийг илрүүлэх энгийн бөгөөд мэдрэмтгий арга юм. Энэ нь эукариот эсийн ДНХ-ийн задралыг хэмждэг ба биомониторинг болон генотоксик шинж чанарыг шалгах стандарт арга юм.
Сүүлт одны шинжилгээ нь бага хайлах цэгийн агарозын суспенз дэх эсийг капсулжуулах, төвийг сахисан эсвэл шүлтлэг нөхцөлд эсийг задлах, түдгэлзүүлсэн задралын эсийг электрофорез хийхэд оролцдог. Капсулжуулалтын явцад эсүүд хайлсан бага хайлах цэгт агарозд түдгэлздэг ба агароз нь нүүрсустөрөгчийн утаснуудын матрицыг бүрдүүлэн тэдгээрийг бэхлэх болно. Агароз нь osmically саармаг юм; тиймээс энэ нь уусмалыг гельээр нэвтлэн эсийг хөндөх, шилжүүлэхгүйгээр нөлөөлөх боломжийг олгодог. Лизисийн уусмал нь өндөр концентрацитай усан давсны уусмал ба угаалгын нунтаг юм. Энэ давс нь эсийн РНХ-ийн агуулгыг тасалдуулж, уураг болон эсийн доторх холболтын хэв маягийг тасалдуулж өгдөг. Эсүүд устгаж, бүх уураг, РНХ, цитоплазм болон нуклеоплазмын бүрэлдэхүүн хэсгүүд нь агарозын матрицыг тасалдуулж, тархаж, ДНХ-г үлдээдэг.
Зураг 02: Сүүлт одны шинжилгээ
Электрофорезын уусмал нь шүлтлэг уусмал бөгөөд ДНХ-ийн давхар спираль денатурат болж, нуклеоид нь нэг судалтай болдог. Энэ процессын явцад зургийг шинжлэхийн тулд цахилгаан талбарыг ашигладаг. Зургийн шинжилгээ нь ДНХ болон нуклеоидын флюресценцийн ерөнхий эрчмийг хэмжиж, хоёрыг харьцуулдаг. Нийт бүтэц нь үлдсэн гэмтэлгүй ДНХ-д тохирсон дугуй толгойтой сүүлт одтой төстэй бөгөөд гэмтсэн ДНХ-ийн сүүлтэй. Илүү хүчтэй дохионы улмаас сүүл нь илүү тод, урт байх тусам гэмтлийн түвшин өндөр болно.
Микроцөм болон сүүлт одны шинжилгээний хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- Micronucleus болон сүүлт одны шинжилгээ нь хэмнэлттэй, хурдан, тохиромжтой бөгөөд бага ур чадвар шаарддаг.
- Тэдгээрийг голчлон ДНХ дээр хийдэг.
- Хоёр шинжилгээ нь мутаци болон хромосомын эмгэгийг үнэлэхэд тусалдаг.
- Түүгээр ч барахгүй, энэ хоёр арга нь процедурыг гүйцэтгэхдээ химийн бодис ашигладаг.
Микроцөм болон сүүлт одны шинжилгээний ялгаа юу вэ?
Бичил цөмийн шинжилгээ нь мутагений нөлөөгөөр хромосомын гэмтлийг шалгахад чухал ач холбогдолтой бол сүүлт одны шинжилгээ нь бие даасан эсүүдийн анхдагч ДНХ-ийн гэмтлийг илрүүлэхэд чухал ач холбогдолтой. Тиймээс энэ нь бичил цөм ба сүүлт одны шинжилгээний гол ялгаа юм. Мөн микронуклеусын шинжилгээ нь кластоген ба аневгенийг илрүүлэхийн тулд сайн батлагдсан. Сүүлт одны шинжилгээг эс дэх анхдагч ДНХ-ийн гэмтлийг илрүүлэхийн тулд генотоксик шинж чанар болгон ашигладаг. Түүнээс гадна бичил цөмийн шинжилгээ нь химийн бодисын тогтвортой байдлын талаарх мэдээллийг өгдөг бол сүүлт одны шинжилгээ нь нэг эсийн гель электрофорез юм.
Доорх инфографик нь бичил цөм болон сүүлт одны шинжилгээний ялгааг зэрэгцүүлэн харьцуулах зорилгоор хүснэгт хэлбэрээр үзүүлэв.
Хураангуй – Микроцөм ба сүүлт одны шинжилгээ
Генотоксик байдлын шинжилгээ нь мутаци болон хромосомын эмгэгийн боломжуудыг үнэлэхэд тусалдаг. Микронуклеусын шинжилгээ ба сүүлт одны шинжилгээ нь генотоксик байдлын шинжилгээний хоёр арга юм. Микронуклеусын шинжилгээ нь мутаген өртсөний үр дагавар болох хромосомын гэмтлийг үнэлдэг. Сүүлт одны шинжилгээ нь ДНХ-ийн гэмтлийг илрүүлэх энгийн бөгөөд мэдрэмтгий арга юм. Энэ бол микроцөм ба сүүлт одны шинжилгээний гол ялгаа юм. Микронуклеусын шинжилгээ нь ээрэх болон микронуклей үүсгэдэг химийн бодисыг илрүүлэхэд чухал ач холбогдолтой. Сүүлт одны шинжилгээ нь бага хайлах цэгийн агароз суспенз дэх эсийг капсулжуулах, төвийг сахисан эсвэл шүлтлэг нөхцөлд эсийг задлах, түдгэлзүүлсэн задралын эсийг электрофорез хийхэд оролцдог.
