Гол ялгаа - Нитроцеллюлоз ба нейлон мембран
Blotting нь молекул биологийн ДНХ, РНХ, уургийн холимогоос тодорхой дарааллыг илрүүлэх чухал арга юм. Үүнийг blot гэж нэрлэдэг мембран ашиглан хийдэг. Хойд, өмнөд, баруун blotting гэх мэт өөр өөр арга техникүүд байдаг. Өвөрмөц бус холболт, буруу илрүүлэлтээс урьдчилан сэргийлэхийн тулд бүдгэрүүлэх процесст тохирох мембраныг сонгохдоо болгоомжтой хийх хэрэгтэй. Нитроцеллюлоз, нейлон, PVDF нь хатаах аргад өргөн хэрэглэгддэг мембран юм. Тэд өөр өөр шинж чанартай байдаг. Нитроцеллюлоз ба нейлон мембраны гол ялгаа нь нитроцеллюлозын мембран нь уураг хөдөлгөөнгүй болгох өндөр чадвартай байдаг бол нейлон мембран нь нуклейн хүчлийг хөдөлгөөнгүй болгох өндөр чадвартай байдаг. Гэсэн хэдий ч хоёр төрлийн мембраныг цэвэрлэх аргад ихэвчлэн ашигладаг.
Нитроцеллюлозын мембран гэж юу вэ?
Нитроцеллюлозын мембран нь нуклейн хүчил болон уураг арилгах арга техникт өргөн хэрэглэгддэг мембран шүүлтүүр юм. Энэ нь уураг холбох өндөр чадвартай. Тиймээс нитроцеллюлозын мембраныг western blotting техникт өргөн ашигладаг. Нитроцеллюлозын мембран нь эрлийзжүүлэх бүх арга техниктэй нийцдэг бөгөөд хөндлөнгийн оролцоогүйгээр дээд зэргийн холбох чадварыг харуулдаг. Нитроцеллюлозын мембран нь байгалийн гидрофил шинж чанартай байдаг. Тэд молекулуудтай гидрофилик харилцан үйлчлэлцэж, мембран дээр үр дүнтэй хөдөлгөөнгүй болгодог. Арилжааны нитроцеллюлозын мембраныг 0.45 ба 0.2 мкм гэсэн хоёр нүхний хэмжээтэй авах боломжтой.
Зураг 01: Баруун blotting-д ашигласан нитроцеллюлозын мембран
Нейлон мембран гэж юу вэ?
Нэйлон мембран нь цэвэрлэх аргад хэрэглэгддэг өөр төрлийн арилжааны мембран юм. Энэ нь өмнөд болон хойд хэсгийг цэвэрлэхэд нитроцеллюлозын мембрантай хамт хэрэглэгддэг. Нейлон мембран нь ДНХ-тэй холбогддог тул нитроцеллюлозоос илүү өмнөд хэсгийг цэвэрлэхэд тохиромжтой. Нейлон мембраны хэд хэдэн өвөрмөц онцлогоос шалтгаалан судлаачид нитроцеллюлозын мембраны оронд өмнөд болон хойд хэсгийг цэвэрлэхэд ихэвчлэн нейлон мембраныг ашигладаг. Нитроцеллюлозоос ялгаатай нь нейлон мембраныг хөрс хуулалт, тайрч авахыг зөвлөж байна.
Зураг 02: Нейлон мембраныг өмнөд хэсэгт будахад ашигласан
Нитроцеллюлоз ба нейлон мембран хоёрын ялгаа нь юу вэ?
Нитроцеллюлоз ба Nylon мембран |
|
| Нитроцеллюлозын мембран хэврэг. | Нейлон мембран нь хэврэгшил багатай. |
| Харьцаж байна | |
| Тэдгээрийг зохицуулахад хэцүү. | Тэдгээрийг зохицуулахад хялбар. |
| Зэмлэх | |
| Дэмжигдээгүй нитроцеллюлозын мембраныг шалгахад хэцүү. | Нейлон мембранаар тайрах нь амархан. |
| Хадгалалтын янз бүрийн нөхцөлд нийцтэй байх | |
| Нитроцеллюлозын мембран нь янз бүрийн хадгалах нөхцлийг тэсвэрлэх чадвар багатай. | Нейлон мембран нь янз бүрийн хадгалах нөхцөлд илүү бат бөх хариу үйлдэл үзүүлдэг. |
| Ашиглах | |
| Урьдчилан чийгшүүлэх шаардлагатай. | Нейлон мембраныг урьдчилан чийглэх шаардлагагүй. |
| Гидрофиль байгаль | |
| Нитроцеллюлозын мембран нь гидрофиль шинж чанартай боловч нейлон мембранаас бага гидрофил юм. | Тэдгээр нь маш их гидрофиль шинж чанартай. |
| Хөдөлгөөнгүй болох боломж | |
| Нитроцеллюлозын мембран нь нуклейн хүчлүүдтэй харьцангуй бага байдаг. Гэхдээ энэ нь уурагтай өндөр холбоотой. | Нейлон мембран нь нитроцеллюлозын мембранаас илүү нуклейн хүчлүүдтэй холбогдох чадвар өндөртэй. |
Хураангуй – Нитроцеллюлоз ба Nylon мембран
Нитроцеллюлоз ба нейлон мембранууд нь гель дээрх туузны хэв маягийг хуулбарлахын тулд арчих техникт ашигладаг тусгай хуудас юм. Эдгээр нь мембран дээр хөдөлгөөнгүй болгох замаар хольцоос тодорхой дараалал эсвэл уураг илрүүлэх боломжийг олгодог. Мембран дээр молекулууд хөдөлгөөнгүй болсны дараа үүнийг шошготой датчикаар эрлийзжүүлэх шинжилгээнд субстрат болгон ашиглаж болно. Нитроцеллюлозын мембран нь уурагтай өндөр холбоотой байдаг тул баруун blot техникт уураг илрүүлэхэд ихэвчлэн ашиглагддаг. Нейлон мембраныг ихэвчлэн өмнөд болон хойд хэсгийг цэвэрлэхэд ашигладаг. Энэ бол нитроцеллюлоз ба нейлон мембраны ялгаа юм.
