Үндсэн ялгаа – RPMI ба DMEM
Ихэнх судалгааны судалгаанууд нь амьтны эсийн өсгөвөрлөлийг хамардаг тул эдгээр судалгаанууд нь тусгай өсөлтийн нөхцөлд амьтны эсийн шугамыг арчлахыг шаарддаг. Амьтны эсийг өсгөвөрлөх нь эмийн бодисын солилцоог тодорхойлох, өвчний оношлогоо, хорт хавдрын судалгаанд зориулагдсан фармакологийн судалгаанд өргөн хэрэглэгддэг. Эсийн өсгөвөрлөгч нь амьтны эсийн өсгөврийн чухал хэсэг юм. Дулбеккогийн өөрчилсөн бүргэдийн дунд (DMEM) болон Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) нь амьтны эсийн өсгөвөрлөхөд ашигладаг хоёр өсгөвөрлөгч юм. RPMI нь хөхтөн амьтдын эсийг суспензийн өсгөвөрт өсгөвөрлөхөд өргөн хэрэглэгддэг хэвлэл мэдээллийн хэрэгсэл юм. DMEM нь амин хүчил, витамины агууламжийг 4 дахин ихэсгэдэг суурь орчинг өөрчилсөн төрөл юм. DMEM нь наалдсан өсгөвөрт эсийг өсгөвөрлөхөд ашиглагддаг. Хоёр хэвлэл мэдээллийн гол ялгаа нь хэвлэл мэдээллийн соёлын төрөл юм. RPMI-ийг суспензийн өсгөвөрт ашигладаг бол DMEM нь наалдсан эсийг өсгөвөрлөхөд ашиглагддаг.
RPMI гэж юу вэ?
RPMI буюу Roswell Park Memorial Institute Medium-ийг мөн RPMI 1640 гэж нэрлэдэг. Хэвлэл мэдээллийн хэрэгслийг нээсэн хүрээлэнгээс хэвлэл мэдээллийн хэрэгслийн нэрийг авсан. Энэ зөөвөрлөгчийг амьтны эсийн өсгөвөрт, ялангуяа хөхтөн амьтдын эсийн өсөлтөд ихэвчлэн ашигладаг. Тэдгээрийг анх хүний лимфоцитыг ургуулах зорилгоор бүтээсэн.
Дараах орцуудыг RPMI-д оруулсан болно.
- Глюкоз
- pH үзүүлэлт (фенол улаан)\
- Давс (натрийн хлорид, натрийн бикарбонат, динатрийн фосфат, калийн хлорид, магнийн сульфат, кальцийн нитрат)
- Амин хүчил
- Витаминууд (и-иноцитол, холин хлорид, пара-аминобензой хүчил, фолийн хүчил, никотинамид, пиридоксин гидрохлорид, тиамин гидрохлорид, кальцийн пантотенат, биотин ба рибофлавин, цианокобаламин)
RPMI-ийн онцлог нь орчин дахь фосфатын агууламж нэмэгдсэн явдал юм. RPMI-ийг 5% нүүрстөрөгчийн давхар ислийн агаар мандалд ашигладаг. Энэ нь эсийн өсөлтийн хамгийн дээд, оновчтой нөхцлийг бүрдүүлнэ. Бикарбонатын буферийн системээр зөөвөрлөгчийн рН-ийг 8.0-д барьдаг.
Зураг 01: Петрийн тавган дээрх эсийн өсгөвөр
Эс өсгөвөрлөхөд RPMI-ийн хэрэглээ
- Хүний Т ба В лимфоцит, ясны чөмөгний эсүүд болон эрлийзүүдийн тариалалт.
- Хүний хавдрын эсийг судлахад ашигладаг.
DMEM гэж юу вэ?
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) нь худалдаанд бэлтгэгдсэн хувиргасан тэжээл юм. Дунд зэргийн нунтагны анхны бүтэц нь шар өнгөтэй. DMEM-д витамины концентрацийг 4 дахин нэмэгдүүлснээр тэжээллэг бодисын агууламж нэмэгддэг.
DMEM-ийг мөн төмрийн нитрат, натрийн пируват болон серин, глицин зэрэг чухал бус амин хүчлүүд зэрэг нэмэлт давс нэмснээр өөрчилдөг. Хэвлэл мэдээллийн хэрэгсэл дэх глюкозын найрлага мөн өөрчлөгддөг. Анхны найрлага нь 1000 мг/л глюкозоос бүрддэг бол DMEM-д концентраци 4500 мг/л хүртэл нэмэгддэг. DMEM нь бүрэн тэжээлт орчин биш тул ийлдэс тэжээл өгөх шаардлагатай. Ихэнх тохиолдолд DMEM нь ургийн үхрийн ийлдэс (FBS) -ээр нэмэгддэг. FBS нь өсгөвөрлөх үйл явцад шаардлагатай уураг болон өсөлтийн хүчин зүйлсийг хангадаг.
Натрийн бикарбонат нэмэхэд орчны рН өөрчлөгддөг. Натрийн бикарбонатыг нэмэхээс өмнө орчны рН нь 6.80-7.40 орчим байдаг бол натрийн бикарбонатыг нэмсний дараа рН нь 7.60-8.20 хооронд байна. Дунд зэргийн хадгалах температур 2 – 8 0C.
Зураг 02: DMEM
DMEM-н хэрэглүүр
- Хулганы үр хөврөлийн эсэд полиомавирусын товруу үүсгэх чадварыг судлах.
- Холбоо барихыг хориглох судалгаанд.
- Тахианы эсийн өсгөвөрийн судалгаа, шинжилгээнд.
RPMI болон DMEM хоёрын ижил төстэй талууд юу вэ?
- RPMI болон DMEM-ийг хоёуланг нь амьтны эсийн өсгөвөрт ашигладаг.
- RPMI болон DMEM медиа хоёулаа шингэн найрлагатай.
- RPMI болон DMEM медиа хоёулаа өсөлтөд шаардлагатай амин хүчлүүд, витаминууд болон органик бус давсуудыг агуулдаг.
- RPMI болон DMEM медиа хоёулаа бүрэн бус байна. Тиймээс ийлдэс нэмэх хэрэгтэй.
- RPMI болон DMEM медиа хоёулаа глюкозыг нүүрстөрөгчийн эх үүсвэр болгон ашигладаг.
- RPMI болон DMEM медиа хоёулаа илүү өндөр рН-тэй.
RPMI болон DMEM хоёрын ялгаа юу вэ?
RPMI ба DMEM |
|
| RPMI нь хөхтөн амьтдын эсийг суспензийн өсгөвөрт өсгөвөрлөхөд өргөн хэрэглэгддэг орчин юм. | DMEM нь амин хүчил, витамины агууламж нэмэгдсэн, өөрчлөгдсөн суурь тэжээлт орчин юм. |
| Нэмэлт фосфат байгаа эсэх | |
| RPMI-д үзүүлэв. | DMEM-д байхгүй. |
| Ашиглах | |
|
Наалдсан өсгөвөрт эсийг өсгөвөрлөхөд ашигладаг. Энэ нь -д дассан
|
| Соёлын төрлүүд | |
| RPMI-ийг суспензийн өсгөвөрт ашигладаг. | DMEM нь эс наалдсан өсгөвөрт ашиглагддаг. |
Хураангуй – RPMI ба DMEM
RPMI болон DMEM хоёулаа амьтны эсийн өсгөвөрлөхөд өргөн хэрэглэгддэг, ялангуяа лимфоцитуудыг in vitro хэлбэрээр өсгөвөрлөхөд өргөн хэрэглэгддэг. DMEM нь шим тэжээлийн агууламж нэмэгдэж байгаа өөрчлөгдсөн суурь орчин юм. RPMI нь Roswell Park Memorial Institute-ийн боловсруулсан бөгөөд энэ нь мөн амьтны эсийг өсгөвөрлөхөд, ялангуяа хөхтөн амьтдын лимфоцитуудад ашиглагддаг орчин юм. Хоёр хэвлэл мэдээллийн хэрэгслээр худалдаанд гарах боломжтой. Энэ нь RPMI болон DMEM хоёрын ялгаа юм.
