Ойролцоо болон ион солилцооны хроматографийн гол ялгаа нь бид хольц дахь цэнэгтэй болон цэнэггүй бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгахад ойртох хроматографийг ашиглаж, харин хольц дахь цэнэгтэй бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгахад ион солилцооны хроматографийг ашиглаж болно.
Хроматографи нь холимог дахь хүссэн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг салгахад ашиглаж болох арга юм. Шингэн хроматографи, хийн хроматографи гэх мэт өөр өөр төрлүүд байдаг. Ойрын хроматографи ба ион солилцооны хроматографи нь шингэний хроматографийн хоёр дэд ангилал юм. Мөн эдгээр техникүүдэд хоёр үе шат байдаг. Тухайлбал, эдгээр нь суурин үе ба хөдөлгөөнт үе шат юм. Эдгээр аргын зорилго нь хөдөлгөөнгүй фазын гадаргуу дээр бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн холболтоос хамааран бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг салгах явдал юм.
Афинитын хроматографи гэж юу вэ?
Афинитын хроматографи нь эдгээр бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн харилцан үйлчлэлээс хамааран холимог дахь бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгахад ашигладаг биохимийн арга юм.
Энэ тохиолдолд бидний ашигладаг харилцан үйлчлэлд дараах зүйлс орно:
- Антиген-эсрэгбиеийн харилцан үйлчлэл
- Фермент-субстратын харилцан үйлчлэл
- Рецептор-лигандын харилцан үйлчлэл
- Уураг-нуклейн хүчлийн харилцан үйлчлэл
Энэ техникт бид молекулуудын молекулын шинж чанарыг энэхүү салгах техникт ашигладаг. Энд бид хүссэн нэгдэл нь устөрөгчийн холбоо, ионы харилцан үйлчлэл, дисульфидын гүүр, гидрофобик харилцан үйлчлэл гэх мэт замаар суурин фазтай харилцан үйлчлэх боломжийг олгодог. Хөдөлгөөнгүй фазтай харьцдаггүй молекулууд эхлээд ялгарна. Тиймээс бид үүнийг хольцоос салгаж болно. Хүссэн нэгдэл нь суурин үе шатанд наалдсан хэвээр байх болно. Тиймээс бид үүнийг ялгаруулагч уусгагчаар салгаж, мөн ялгахын тулд ялгаруулж болно.
Зураг 01: Хроматографийн багана
Афинитын хроматографи нь буфер уусмал ашиглан хольцоос бодисыг цэвэршүүлэх, баяжуулахад тустай. Мөн хольц дахь хүсээгүй бодисыг багасгахад тустай. Энэ процесст ашигладаг төхөөрөмжийг авч үзэхдээ бид суурин фазаараа дүүргэсэн баганыг ашиглах хэрэгтэй. Дараа нь бид салгах гэж буй биомолекулуудыг агуулсан хөдөлгөөнт фазыг ачаалах ёстой. Дараа нь тэдгээрийг хөдөлгөөнгүй фазтай холбохыг зөвшөөрнө үү. Дараа нь угаах буфер ашиглан бид зорилтот бус биомолекулуудыг салгаж болох боловч салгах үйл явцыг амжилттай явуулахын тулд зорилтот молекулууд нь хөдөлгөөнгүй фазтай өндөр хамааралтай байх ёстой.
Ионы солилцооны хроматограф гэж юу вэ?
Ионы хроматографи нь ионы бодисыг шинжлэх боломжтой шингэн хроматографийн нэг хэлбэр юм. Ихэнхдээ бид үүнийг органик бус анион ба катионуудыг (жишээлбэл, хлорид ба нитратын анионууд, кали, натрийн катионууд) шинжлэхэд ашигладаг. Энэ нь бага түгээмэл боловч бид органик ионуудыг шинжилж болно. Түүнээс гадна уураг нь тодорхой рН-ийн утгуудаар цэнэглэгдсэн молекулууд байдаг тул бид энэ аргыг уураг цэвэршүүлэхэд ашиглаж болно. Энд бид цэнэглэгдсэн бөөмсийг холбож болох хатуу хөдөлгөөнгүй фазыг ашигладаг. Жишээлбэл, бид давирхайн полистирол-дивинилбензол сополимерийг хатуу тулгуур болгон ашиглаж болно.
Зураг 02: Ионы солилцооны хроматографийн үе шат
Үүнийг цааш тайлбарлахын тулд суурин фаз нь сульфатын анион эсвэл дөрөвдөгч амин катион зэрэг тогтмол ионуудтай байдаг. Хэрэв бид энэ системийн төвийг сахихыг хүсвэл эдгээр нь тус бүр нь эсрэг ионтой (эсрэг цэнэгтэй ион) холбоотой байх ёстой. Энд хэрэв эсрэг ион нь катион бол бид системийг катион солилцооны давирхай гэж нэрлэнэ. Харин эсрэг ион нь анион бол систем нь анион солилцооны давирхай болно.
Ион солилцооны процесст таван үндсэн үе шат байдаг;
- Анхны үе шат
- Зорилтотыг шингээх
- Уусгах эхлэл
- Элюцийн төгсгөл
- Сэргээх
Ойролцоо ба ион солилцооны хроматографийн ялгаа нь юу вэ?
Афинитын хроматографи нь эдгээр бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн харилцан үйлчлэлээс хамааран холимог дахь бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгахад ашигладаг биохимийн арга бол ионы хроматографи нь ионы бодисыг шинжлэх боломжтой шингэн хроматографийн нэг хэлбэр юм. Тиймээс ойр дотно байдал ба ион солилцооны хроматографийн гол ялгаа нь бид ион солилцооны хроматографийг зөвхөн ионы бодисыг салгахад ашиглах боломжтой байдаг бол ойрын хроматограф нь цэнэглэгдсэн болон цэнэггүй хэсгүүдийг салгах чадвартай байдаг. Ажлын зарчмыг авч үзэхэд ойр дотно байдал ба ион солилцооны хроматографийн ялгаа нь зорилтот молекулууд нь суурин фазын хувьд өндөр хамааралтай байдаг тул ойрын хроматографи үргэлжилдэг. Гэсэн хэдий ч ион солилцооны хроматографийн хувьд зорилтот молекулууд нь суурин фазын гадаргуугийн цэнэгийн эсрэг цэнэгтэй байдаг.
Доорх инфографик нь ойр дотно байдал болон ион солилцооны хроматографийн хоорондох ялгааг зэрэгцүүлэн харуулдаг.
Товч мэдээлэл – Ион солилцооны хроматограф ба ойр дотно байдал
Дүгнэж хэлэхэд ойр дотно байдал ба ион солилцооны хроматографи нь шингэн хроматографийн хоёр хэлбэр юм. Ойролцоох чанар ба ион солилцооны хроматографийн гол ялгаа нь бид хольц дахь цэнэгтэй болон цэнэггүй бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг салгахад ойртох хроматографийг ашиглаж, харин хольц дахь цэнэгтэй бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгахад ион солилцооны хроматографийг ашиглаж болно.
