RP HPLC болон HIC-ийн гол ялгаа нь RP HPLC нь илүү туйлтай хөдөлгөөнт фаз, бага туйлтай хөдөлгөөнгүй фаз ашигладагт оршино. Харин HIC нь гидрофобик суурин фазыг ашигладаг бөгөөд энэ нь гидрофобик молекулуудыг түүнд наалдуулах боломжийг олгодог.
Хроматографи нь хольцыг бүрэлдэхүүн хэсгүүдэд нь ялгахад тусалдаг аналитик арга юм. Эхлээд бид дээжийг уусмал болгон уусгах хэрэгтэй. Энэхүү уусмал-бодисын хольцыг хөдөлгөөнт фаз гэж нэрлэдэг. Дараа нь хөдөлгөөнт фаз нь суурин үе гэж нэрлэгддэг өөр материалаар дамждаг. Хөдөлгөөнгүй үе шат нь бүрэлдэхүүн хэсгүүдийн тусгаарлалтыг тодорхойлдог. Хөдөлгөөнт фаз ба суурин фазын хооронд материалыг хуваах замаар тусгаарлалт үүсдэг.
RP HPLC гэж юу вэ?
RP HPLC гэдэг нэр томъёо нь урвуу фазын өндөр үзүүлэлттэй шингэний хроматограф гэсэн үг юм. Энэ нь холимог дахь бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг гидрофобик чанараар нь салгахад оршино. Хөдөлгөөнт фазын гидрофобик бүрэлдэхүүн хэсгүүд нь хөдөлгөөнгүй фазын гидрофобик лигандуудтай холбогддог бол гидрофилик бүрэлдэхүүн хэсгүүд нь хөдөлгөөнгүй фазын гадаргууд наалдалгүйгээр хөдөлгөөнгүй фазаар ялгардаг.
Зураг 01: HPLC аппарат
Түүгээр ч зогсохгүй энэ арга нь бусад хроматографийн аргуудтай харьцуулахад илүү давтагдах чадвартай бөгөөд өргөн хэрэглээний боломжтойг харуулж байна. Тиймээс бид HPLC-ийн бүх аргуудын 75 гаруй хувьд нь лабораторид энэ аргыг ашигладаг. Ихэнх тохиолдолд бид уусдаг туйлын органик уусгагчтай усны усан хольцыг хөдөлгөөнт фаз болгон ашигладаг. Тиймээс энэ нь уусмал дахь гидрофобик бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг суурин фазын гадаргуу дээр бэхлэх болно.
HIC гэж юу вэ?
HIC гэсэн нэр томъёо нь Гидрофобик харилцан үйлчлэлийн хроматограф гэсэн үг юм. Энэ нь урвуу фазын HPLC-ийн нэг төрөл бөгөөд энэ аргыг уураг зэрэг том биомолекулуудыг салгахад ашигладаг. Энэ аргын хувьд бид биомолекулын дээжийг хийхийн тулд усан орчин ашиглах хэрэгтэй. Учир нь органик уусгагчид уургийн денатурат үүсгэдэг. Түүнчлэн, энэ техник нь суурин фазын бага зэрэг гидрофобик гадаргуутай том молекулуудын харилцан үйлчлэлийг ашигладаг. Цаашилбал, дээжинд агуулагдах давсны агууламж өндөр байх ёстой, учир нь энэ нь уураг савлагаа дээр үлдэхийг дэмждэг; Энэ процессыг давслах гэж нэрлэдэг. Давсны концентрацийг аажмаар бууруулснаар бид биомолекулуудыг гидрофобик чанараар нь тусад нь ялгаруулж чадна.
Ихэвчлэн энэ арга нь ион солилцооны хроматографийн эсрэг нөхцөлийг ашигладаг. Энэ техникт эхлээд дээж дэх ууссан бодисын уусалтыг багасгахын тулд буфер уусмалыг баганаар дамжуулах хэрэгтэй. Энэ нь уургийн гидрофобик хэсгүүдийг ил болгодог. Гэсэн хэдий ч, молекул нь илүү гидрофобик байвал холболтыг дэмжихийн тулд бага давс шаардагдана. Энд бага гидрофоб ууссан бодисыг эхлээд, давсны концентрацийн өөрчлөлтийн дагуу илүү их гидрофоб ууссан бодисыг хамгийн сүүлд шүүнэ.
RP HPLC болон HIC хоёрын ялгаа юу вэ?
Хроматографи нь холимог дахь бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгах аналитик арга юм. RP HPLC ба HIC нь хоёр тусгай хроматографийн арга юм. RP HPLC ба HIC хоёрын гол ялгаа нь RP HPLC нь илүү туйлтай хөдөлгөөнт фаз, бага туйлт суурин фазыг ашигладаг бол HIC нь гидрофобик суурин фазыг ашигладаг бөгөөд энэ нь гидрофобик молекулуудыг түүн дээр бэхлэх боломжийг олгодог.
Доорх инфографик нь RP HPLC болон HIC хоорондын ялгааг нэгтгэн харуулав.
Хураангуй – RP HPLC ба HIC
Хроматографи нь холимог дахь бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг ялгах аналитик арга юм. RP HPLC ба HIC нь хоёр тусгай хроматографийн арга юм. RP HPLC ба HIC хоёрын гол ялгаа нь RP HPLC нь илүү туйлтай хөдөлгөөнт фаз, бага туйлт хөдөлгөөнгүй фазыг ашигладаг бол HIC нь гидрофобик суурин фазыг ашигладаг бөгөөд энэ нь гидрофобик молекулуудыг түүнд наалдуулах боломжийг олгодог.
