Үндсэн ялгаа – YAC ба BAC векторууд
Векторуудыг молекул клончлоход ашигладаг. Векторыг гадны генийн материалыг өөр эс рүү зөөх тээврийн хэрэгслийн үүрэг гүйцэтгэдэг ДНХ молекул гэж тодорхойлж болно. Гадны ДНХ агуулсан векторыг рекомбинант ДНХ гэж нэрлэдэг бөгөөд үүнийг эзэн организм дотор хуулбарлах, илэрхийлэх чадвартай байх ёстой. Мөөгөнцрийн хиймэл хромосом (YAC) ба бактерийн хиймэл хромосом (BAC) нь клончлоход оролцдог хоёр төрлийн вектор юм. YAC ба BAC хоёрын гол ялгаа нь YAC нь мөөгөнцрийн хромосомын тодорхой хэсгийг ашиглан удамшлын материалын том сегментийг мөөгөнцрийн эсэд оруулахын тулд зохиомлоор бүтээгдсэн вектор систем бөгөөд BAC нь Е.coli хромосом нь ДНХ-ийн том сегментүүдийг E. coli эсүүдэд оруулах.
YAC вектор гэж юу вэ?
YAC (Мөөгөнцрийн хиймэл хромосом) нь гадны ДНХ-ийн том сегментийг зөөвөрлөх чадвартай, мөөгөнцрийн эс дотор үржих чадвартай, зохиомлоор бүтээгдсэн хромосом юм. Энэ нь центромер, теломер, түүнчлэн репликаци, тогтвортой байдалд зайлшгүй шаардлагатай бие даасан хуулбарлах дараалалтай. YAC нь үр дүнтэй клончлох вектор болгохын тулд сонгомол тэмдэглэгээ эсвэл тэмдэглэгээ, хязгаарлалтын сайтуудыг агуулсан байх ёстой. 1000 кб-аас 2000 кб хүртэлх том дарааллыг YAC-д оруулж, мөөгөнцөрт шилжүүлж болно. YAC-ийн хувиргах үр ашиг маш бага байна.
Зураг 01: YAC Vector
BAC вектор гэж юу вэ?
Бактерийн хиймэл хромосом (BAC) нь молекул клончлох зориулалттай зохиомлоор бүтээгдсэн хромосом юм. Энэ нь E. coli F плазмидын тодорхой хэсгүүдтэй бөгөөд дугуй хэлбэртэй, супер ороомогтой. BAC нь ДНХ-ийн хэсгүүдийг бактери, ялангуяа E. coli-д хувилах зорилгоор бүтээгдсэн. Энэ нь 300 кб хүртэлх хэмжээтэй ДНХ-ийн хэсгүүдийг агуулж чаддаг. YAC-тай харьцуулахад BAC клончлолын оруулга нь жижиг хэмжээтэй байдаг. BAC-уудыг 1992 онд боловсруулсан бөгөөд тогтвортой байдал, барилгын ажилд хялбар байдгаараа алдартай хэвээр байна. BAC нь вакцин боловсруулахад бас тустай.
Зураг 02: Молекулын клон дахь BAC вектор
YAC болон BAC векторуудын ялгаа нь юу вэ?
YAC ба BAC векторууд |
|
| YAC нь клончлох зорилгоор мөөгөнцрийн ДНХ ашигладаг генийн инженерчлэгдсэн хромосом юм. | BAC нь клончлох зорилгоор E. coli ДНХ-г ашигладаг генийн инженерчлэлийн ДНХ молекул юм. |
| Хүйс | |
| YAC нь геномын ДНХ-ийн том хэсгүүдийг мөөгөнцөрт хувилахад зориулагдсан. | BAC-уудыг их хэмжээний геномын фрагментуудыг Escherichia coli-д хувилах зорилгоор бүтээсэн. |
| Оруулах урт | |
| YAC нь мегабаазын хэмжээтэй геномын оруулга агуулж болно.(1000 кб – 2000 кб). | BAC нь 200–300 кб буюу түүнээс бага багтаамжтай оруулга авч болно. |
| Барилга | |
| YAC ДНХ нь бүрэн бүтэн цэвэршүүлэхэд хэцүү бөгөөд YAC вектор системийг үүсгэхийн тулд өндөр концентраци шаарддаг. | BAC нь бүрэн бүтэн цэвэршүүлэхэд хялбар бөгөөд амархан бүтээгдэж болно. |
| Химеризм | |
| YAC нь ихэвчлэн химерик байдаг. | BAC нь химерик байх нь ховор. |
| Тогтвортой байдал | |
| YAC тогтворгүй байна. | BAC тогтвортой байна. |
| Өөрчлөлт | |
| Мөөгөнцрийн дахин нэгтгэх нь маш боломжтой бөгөөд үргэлж идэвхтэй хэвээр байна. Тиймээс энэ нь YAC-д устгах болон бусад зохицуулалтыг үүсгэж болно. | Э. coli-ийн дахин нэгтгэхээс сэргийлж, шаардлагатай үед асаана. Тиймээс, энэ нь BAC-ийн хүсээгүй дахин зохицуулалтыг багасгадаг. |
| Засвар үйлчилгээ | |
| Рекомбинант YAC-ийг удирдах нь ихэвчлэн дараагийн залруулга хийх зорилгоор YAC-ийг E. coli руу шилжүүлэхийг шаарддаг. Тиймээс энэ нь маш их хөдөлмөр шаарддаг процесс юм. | BAC өөрчлөлт нь E. coli-д шууд тохиолддог. Тэгэхээр ДНХ шилжүүлэг хийх шаардлагагүй. Тиймээс энэ үйл явц нь хүнд хэцүү биш юм. |
Хураангуй – YAC ба BAC векторууд
YAC нь ДНХ-ийн том хэсгүүдийг эзэн организмд хувилах чадвартай тул клончлох үйл явцад зайлшгүй шаардлагатай судалгааны хэрэгсэл болсон. Гэсэн хэдий ч YAC нь барилгын хүндрэл, химеризм, тогтворгүй байдал гэх мэт векторууд зэрэг хэд хэдэн сул талуудтай байдаг. Иймээс эдгээр бэрхшээлийг даван туулахын тулд эрдэмтэд BAC векторуудыг боловсруулсан. BAC нь E. coli хромосомын тодорхой бүс нутгийг ашиглан бүтээгдсэн. Энэ нь тогтвортой вектор бөгөөд амархан бүтээгддэг. Гэсэн хэдий ч BAC-ийн ажиллах чадвартай ДНХ-ийн урт нь YAC-аас 20 дахин бага байдаг. Энэ бол YAC ба BAC вектор системүүдийн ялгаа юм. Өнөө үед лабораторид YAC-аас BAC-ийг илүүд үздэг.
