HEK293 ба HEK293t хоёрын гол ялгаа нь HEK293 нь хүний үр хөврөлийн бөөрөөс үүсэлтэй мөнхөрсөн эсийн шугам бөгөөд 5ДНХ-ийн зүсэгдсэн аденовирүсээр дамждаг бол HEK293t нь HEK293 анхны эсийн шугамаас гаралтай охин эсийн шугам юм. SV40 репликацын гарал үүслийг агуулсан плазмидын вектороор дамжуулагдсан.
Трансфекцийг ихэвчлэн эсэд гадны ДНХ, РНХ-ийг нэвтрүүлэх, генотип, фенотипэд нөлөөлөх үйл явц гэж тодорхойлдог. Биологи, хими, физикийн янз бүрийн аргаар гадны нуклейн хүчлүүдийг ийм байдлаар нэвтрүүлэх нь эсийн шинж чанарыг өөрчилдөг. Эцсийн эцэст, энэ нь эсийн нөхцөлд генийн үйл ажиллагаа, уургийн илэрхийлэлийг судлах боломжийг олгодог. HEK293 ба HEK293t хоёр эсийн шугам нь трансфекцэнд өртөмтгий байдаг тул эсийн биологийн судалгаанд олон жилийн турш өргөн хэрэглэгдэж ирсэн.
HEK293 гэж юу вэ?
HEK293 нь хүний үр хөврөлийн бөөрөөс гаралтай үхэшгүй мөнхөрсөн эсийн шугам бөгөөд хүний аденовирүсийн төрлийн 5ДНХ-ээр нүүлгэн шилжүүлж олон рекомбинант уураг үүсгэдэг. HEK293-ийг анх 1973 онд Голландын биологич Алекс Ван дер Эб хүний бөөрний эсээс ялгаж авсан. Эдгээр эсийг эмэгтэй ургийн эдийн өсгөвөрт ургуулсан. Хожим нь тэднийг Ван дер Эбийн лабораторийн докторын дараах ажилтан Фрэнк Грахам хүний аденовирүсийн төрлийн 5ДНХ-ээр дамжуулсан. Фрэнкийн 293rd туршилт байсан тул энэ нүдний мөрийг HEK293 гэж нэрлэсэн.
Зураг 01: HEK293
Аденовирүсийн генийг HEK эсийн геномд оруулснаар эдгээр эсүүд маш үр дүнтэй рекомбинант уураг их хэмжээгээр үйлдвэрлэх боломжийг олгодог. Түүнээс гадна аденовирүсийн вектор нь CMV дэмжигч бүсийг агуулдаг; иймээс энэ үр ашгийг улам нэмэгдүүлнэ. Энэ эсийн шугамыг генийн экспрессийн судалгаанд хост болгон ашигласан. Энэ эсийн шугамыг биотехнологийн салбарт мөн генийн эмчилгээнд эмчилгээний уураг үйлдвэрлэхэд ашигладаг.
HEK293t гэж юу вэ?
HEK293t нь өндөр хэмжээний рекомбинант уураг үүсгэхийн тулд SV40 репликацын гарал үүслийг агуулсан плазмидын вектороор дамждаг HEK293 эх эсийн шугамаас гаралтай охин эсийн шугам юм. HEK293t нь SV40 том Т антигенийн мутант хувилбарыг илэрхийлдэг хүний эсийн шугам юм. HEK293t нь Стэнфорд дахь Мишель Карлосын лабораторид HEK29E эсийн шугамыг SV40 том Т антигенийн температурт мэдрэмтгий мутантыг кодлодог плазмидтай тогтвортой шилжүүлэн суулгах замаар бүтээгдсэн. Энэ нь анх 293/tsA1609neo гэж нэрлэгддэг байсан. Учир нь трансфекц нь неомицины эсэргүүцэл ба SV40 том Т антигенийн tsA 1609 аллелийн илэрхийлэлд хүргэдэг эсийн шугамыг бий болгоход хэрэглэгддэг.
Зураг 02: HEK293t
SV40 том Т антигенийн мутант хувилбарын илрэлийн улмаас SV 40 репликацын гаралтай трансфекцсэн плазмидууд рекомбинант уургийн хэмжээг их хэмжээгээр нэмэгдүүлдэг. Энэхүү эсийн шугамыг биотехнологийн үйлдвэрлэлд уургийн экспресс болон рекомбинант ретровирусыг үйлдвэрлэхэд ихэвчлэн ашигладаг.
HEK293 болон HEK293t-ын хооронд ямар төстэй зүйл байдаг вэ?
- HEK293 ба HEK293t нь шилжүүлэн суулгах чадвартай тул эсийн биологийн судалгаанд өргөн хэрэглэгддэг хоёр эсийн шугам юм.
- Хоёр эсийн шугам хоёулаа лабораторийн гаралтай.
- Эдгээр эсийн шугамууд нь рекомбинант уургийн үйлдвэрлэлийн хэмжээг их хэмжээгээр нэмэгдүүлдэг.
- Эдгээр нь хүний үр хөврөлийн бөөрний эсийг плазмидын вектороор шилжүүлэн суулгах замаар үүсдэг.
HEK293 болон HEK293t хоёрын ялгаа юу вэ?
HEK293 нь хүний аденовирүсийн төрлийн 5ДНХ-ээр дамжсан хүний үр хөврөлийн бөөрөөс гаралтай мөнхөрсөн эсийн шугам юм. Үүний эсрэгээр, HEK293t нь SV40 репликацийн гарал үүслийг агуулсан плазмидын вектороор дамжсан HEK293 эх эсийн шугамаас гаралтай охин эсийн шугам юм. Тиймээс энэ нь HEK293 ба HEK293t-ийн гол ялгаа юм. Цаашилбал, HEK293 нь SV40 том Т антигенийн мутант хувилбарыг илэрхийлдэггүй. Нөгөө талаас HEK293t нь SV40 том Т антигенийн мутант хувилбарыг илэрхийлдэг.
Дараах инфографик дээр HEK293 болон HEK293t-ийн ялгааг зэрэгцүүлэн харьцуулахын тулд хүснэгт хэлбэрээр жагсаасан болно.
Хураангуй – HEK293 vs HEK293t
HEK293 ба HEK293t нь тогтвортой өсөлттэй, халдвар дамжих чадвартай тул эсийн биологийн судалгаанд өргөн хэрэглэгддэг хоёр эсийн шугам юм. HEK293 нь хүний үр хөврөлийн бөөрөөс үүсэлтэй мөнхөрсөн эсийн шугам бөгөөд 5ДНХ-ийн зүсэгдсэн аденовирүсээр дамждаг бол HEK293t нь SV40 репликацын гарал үүслийг агуулсан плазмидын вектороор дамжсан HEK293 анхны эсийн шугамаас гаралтай охин эсийн шугам юм. Ингэснээр HEK293 болон HEK293t хоёрын ялгааг нэгтгэн харуулав.
