pBR322 ба pUC19-ийн гол ялгаа нь pBR322 нь 4361 суурь хос урттай плазмидын вектор, харин pUC19 нь 2686 суурь хос урттай плазмидын вектор юм.
Клончлох вектор нь организмд тогтвортой байх боломжтой ДНХ-ийн жижиг хэсэг юм. Энэ нь мөн ДНХ-ийн жижиг хэсэг бөгөөд клончлох зорилгоор гадаад ДНХ-ийн хэлтэрхий оруулах боломжтой. Вектор нь хязгаарлах газар, сонгогдох маркер, сурвалжлагч ген, экспрессийн элемент гэх мэт гадаад ДНХ-ийн фрагментийг векторуудад хялбар оруулах боломжийг олгодог чухал шинж чанаруудыг агуулдаг. Клонжуулалтыг анх E. ашиглан хийсэн.коли. E. coli-г клонжуулах векторуудад плазмид, бактериофаг, космид, бактерийн хиймэл хромосом (BAC) орно. Хамгийн түгээмэл хэрэглэгддэг векторууд нь генийн инженерчлэгдсэн плазмидууд юм. pBR322 ба pUC19 нь хоёр төрлийн плазмидын вектор юм.
pBR322 гэж юу вэ?
pBR322 нь плазмидын вектор юм. Энэ нь E. coli-г клонжуулах анхны өргөн хэрэглэгддэг векторуудын нэг юм. Энэ векторыг анх 1977 онд Сан Францискогийн Калифорнийн их сургуулийн Герберт Бойерын лабораторид бүтээжээ. Энэ нь 4361 суурь хос урттай дугуй хоёр судалтай ДНХ юм.
Зураг 01: pBR322
Энэ плазмидын вектор онцгой шинж чанартай. Ер нь энэ нь антибиотикт тэсвэртэй хоёр гентэй байдаг: ампициллиний эсэргүүцлийг кодлодог ген bla (AmpR) уураг болон тетрациклиний эсэргүүцлийг кодлодог tetA ген (TetR) уураг. Түүнээс гадна энэ нь pMB1-ийн хуулбарын гарал үүслийг агуулдаг. Энэхүү плазмидын вектор нь плазмидын хуулбарын дугаарыг хязгаарлагчийг кодлодог роп гентэй. Цаашилбал, энэ вектор нь 40 гаруй хязгаарлах ферментийг хязгаарлах өвөрмөц газруудтай. Эдгээр дөчин хязгаарлалтын 11 нь TetR генд оршдог. TetR генийн дэмжигч дотор хязгаарлах ферментийн HindIII болон ClaI-ийг хязгаарлах хоёр газар байдаг. Цаашилбал, AmpR генийн дотор маш чухал зургаан хязгаарлах газар байдаг. pBR322 нь хуулбарлах тоо багатай клончлох вектор юм. Энэ нь нянгийн эс бүрт ойролцоогоор 20 плазмидын хуулбарыг өгдөг. Векторын молекул жин нь 2.83×106 дальтон.
pUC19 гэж юу вэ?
pUC19 нь 2686 суурь хос урттай плазмидын вектор юм. Энэ бол Йоахим Мессинг болон хамтран ажиллагсдын бүтээсэн плазмидын векторуудын цувралуудын нэг юм. Энэхүү плазмидын цувралын анхны ажлыг Калифорнийн их сургуульд явуулсан. Энэ нь дугуй хэлбэртэй хоёр судалтай ДНХ юм.
Зураг 02: pUC19
Энэ плазмидын вектор бас чухал шинж чанаруудыг агуулна. Энэ нь β глактозидаза (lacz) генийн N төгсгөлийн фрагменттэй. Энэ нь бас олон клон сайт (MCS) бүстэй. Энэ бүс нь lacz генийн 6 ба 7-р кодонуудад хуваагддаг. MCS бүс нь хязгаарлах эндонуклеазыг хязгаарлах олон цэгүүдийг хангадаг. pUC19 нь β глактозидазын генээс гадна ампициллинд тэсвэртэй генийг кодлодог (AmpR). Түүгээр ч барахгүй репликацийн гарал үүсэл нь pMB1 плазмидаас гаралтай. pUC19 нь жижиг хэмжээтэй хэдий ч хуулбарын тоо өндөр (нэг бактерийн эсэд 500-700 хувь) байдаг. Энэ плазмидын векторын молекул жин нь 1.75×106 дальтон.
pBR322 болон pUC19 хоёрын ижил төстэй зүйл юу вэ?
- pBR322 ба pUC19 нь хоёр төрлийн плазмидын вектор юм.
- Тэдгээр нь коли-г клонжуулах түгээмэл векторууд юм.
- Пласмидын вектор хоёулаа pMB1 плазмидын хуулбарлах хэлбэрийн ижил гарал үүсэлтэй.
- Эдгээр векторууд нь олон хязгаарлалтын сайтуудтай.
- Пласмидын вектор хоёулаа сонгогдох маркер болох ампициллиний эсэргүүцлийн гентэй.
pBR322 болон pUC19 хоёрын ялгаа юу вэ?
pBR322 нь 4361 суурь хос урттай плазмидын вектор, харин pUC19 нь 2686 суурь хос урттай плазмидын вектор юм. Тиймээс энэ нь pBR322 ба pUC19-ийн гол ялгаа юм. Цаашилбал, pBR322 нь бага хуулбарын тооны плазмидын вектор, харин pUC19 нь хуулбарын тоо ихтэй плазмидын вектор юм.
Доорх инфографик нь pBR322 болон pUC19-ийн ялгааг зэрэгцүүлэн харьцуулахын тулд хүснэгт хэлбэрээр үзүүлэв.
Хураангуй – pBR322 vs pUC19
E.coli-ийг клонжуулах хамгийн түгээмэл векторууд нь генийн инженерчлэгдсэн плазмидууд юм.pBR322 ба pUC19 нь хоёр төрлийн плазмидын векторууд юм. pBR322 нь 4361 суурь хос урттай плазмидын вектор, харин pUC19 нь 2686 суурь хос урттай плазмидын вектор юм. Энэ бол pBR322 болон pUC19 хоёрын гол ялгаа юм.
