Мөөгөнцрийн нэг эрлийз ба мөөгөнцрийн хоёр эрлийз хоёрын гол ялгаа нь мөөгөнцрийн нэг эрлийз нь ДНХ-уургийн харилцан үйлчлэлийг шинжлэхэд зориулагдсан in vitro дээр суурилсан, харин мөөгөнцрийн хоёр эрлийз нь уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийг шинжлэхэд зориулагдсан in vitro шинжилгээ юм.
Эсийн молекулуудын харилцан үйлчлэлийг судлах нь генийн илэрхийлэл болон уургийн замд оролцдог таних газрыг тодорхойлоход тусална. ДНХ ба уургийн харилцан үйлчлэл нь ДНХ-ийн өөрчлөлт, транскрипцийн зохицуулалт гэх мэт эсийн үйл явцын салшгүй хэсэг юм. Нөгөө талаас уураг ба уургийн харилцан үйлчлэл нь эсийн репликаци, транскрипц, орчуулга, дохио дамжуулалт зэрэг эсийн үйл явцад чухал үүрэг гүйцэтгэдэг. Тиймээс эсийн молекулуудын харилцан үйлчлэлийг янз бүрийн шинжилгээгээр тодорхойлох нь маш чухал юм. Мөөгөнцрийн нэг эрлийз ба мөөгөнцрийн хоёр эрлийз нь ДНХ-уураг болон уураг-уургийн харилцан үйлчлэлд дүн шинжилгээ хийх in vitro-д суурилсан хоёр шинжилгээ юм.
Yast One Hybrid гэж юу вэ?
Мөөгөнцрийн нэг эрлийз (Y1H) нь эсийн доторх ДНХ-уургийн харилцан үйлчлэлийг шинжлэхэд зориулагдсан in vitro шинжилгээ юм. Энэ аргыг анх 1993 онд Ван, Рид нар бий болгосон. Тэр цагаас хойш биологийн судалгаанд илүү их хүчээ үзүүлжээ. Энэ шинжилгээнд ДНХ-ийн өгөөш ба уургийн олз гэсэн хоёр үндсэн бүрэлдэхүүн хэсэг байна.
Зураг 01: Мөөгөнцрийн нэг эрлийз
Процедурын явцад ДНХ-ийн дарааллыг (ДНХ-ийн өгөөш) эхлээд хоёр өөр сурвалжлагчийн (HIS3, LacZ) клонд хуваадаг. Эдгээр сурвалжлагчийн бүтэц нь мөөгөнцрийн омгийн геномд нэгтгэгддэг. Транскрипцийн хүчин зүйлсийг уургийн олз болгон авдаг. Транскрипцийн хүчин зүйлүүд нь эрлийз уураг үүсгэхийн тулд мөөгөнцрийн Gal4 транскрипцийн хүчин зүйлийн транскрипцийн идэвхжүүлэлтийн домайн (AD) -тай нийлдэг. Энэхүү эрлийз уургийг бүхэлд нь мөөгөнцрийн омог руу оруулахын өмнө плазмид руу нэгтгэдэг. Рекомбинант плазмидыг нэвтрүүлсний дараа транскрипцийн хүчин зүйл нь ДНХ-ийн фрагменттэй харилцан үйлчлэх үед AD хэсэг нь сурвалжлагч генийн илэрхийлэл (HIS3 эсвэл LacZ) -ийг идэвхжүүлдэг. Плазмидуудын дараалал нь ДНХ-ийн фрагменттэй холбогдож болох транскрипцийн хүчин зүйлийг тодорхойлох боломжийг олгодог. Саяхан өвчний оношлогооны судалгаанд мөөгөнцрийн нэг эрлийз аргыг ашигласан. Тиймээс ирээдүйд энэ шинжилгээг шинжлэх ухааны судалгаа болон эмнэлгийн эмчилгээнд илүү өргөнөөр ашиглах болно.
Мөөгөнцрийн хоёр эрлийз гэж юу вэ?
Мөөгөнцрийн хоёр эрлийз (Y2H) нь эсийн доторх уураг ба уургийн харилцан үйлчлэлийг шинжлэхэд зориулагдсан in vitro шинжилгээ юм. Энэ аргыг анх 1989 онд Стэнли Филдс, Ок-Кю Сонг нар олсон. Энэхүү техник нь мөөгөнцрийн Gal4 транскрипцийн хүчин зүйлийг ашиглан уураг-уургийн харилцан үйлчлэлийг илрүүлдэг.
Зураг 02: Мөөгөнцрийн хоёр эрлийз
Энэ аргын хувьд эхлээд сонирхсон уураг ашиглан хоёр нэгдэл (эрлийз)-ийг бүтээдэг: нэг уургийг ДНХ холбогч домэйн (DBD)-тай нэгтгэх, нөгөө уургийг Gal4 транскрипцийн хүчин зүйлийн идэвхжүүлэгч домэйн (AD)-тай нэгтгэх замаар.. DBD-тэй нийлсэн уургийг өгөөш, харин AD-тай нийлсэн уургийг олз гэж нэрлэдэг. Мөөгөнцрийн омог дахь өгөөш ба олзны харилцан үйлчлэлийн үед DBD болон AD-ийг ойртуулж, сурвалжлагч генийн дээд хэсэгт функциональ Gal4 транскрипцийн хүчин зүйлийг бий болгодог. Функциональ транскрипцийн хүчин зүйл нь сурвалжлагч генийн илэрхийлэлийг идэвхжүүлдэг. Цаашилбал, энэ аргыг одоогоор хөхтөн амьтдын эсийн салшгүй мембраны уургийн харилцан үйлчлэлийг шалгахад ашиглаж байна.
Мөөгөнцрийн нэг эрлийз болон мөөгөнцрийн хоёр эрлийз хоёрын ижил төстэй зүйл юу вэ?
- Мөөгөнцрийн нэг эрлийз ба мөөгөнцрийн хоёр эрлийз нь ДНХ-уураг болон уураг-уургийн харилцан үйлчлэлд дүн шинжилгээ хийх in vitro-д суурилсан хоёр шинжилгээ юм.
- Эдгээр шинжилгээнд мөөгөнцрийн омог ашигладаг.
- Хоёр шинжилгээнд Gal4 транскрипцийн хүчин зүйлийн идэвхжүүлэх домэйнийг (AD) ашигладаг.
- Тэд харилцан үйлчлэлийг илрүүлэхийн тулд сурвалжлагч ген (HIS3 эсвэл LacZ) илэрхийллийг ашигладаг.
- Тэд өгөөш, олзтой.
- Хоёр шинжилгээ нь орчин үеийн биологийн судалгаанд маш их хэрэгтэй.
Мөөгөнцрийн нэг эрлийз ба мөөгөнцрийн хоёр эрлийз хоёрын ялгаа юу вэ?
Мөөгөнцрийн нэг эрлийз нь ДНХ болон уургийн харилцан үйлчлэлийг шинжлэхэд зориулагдсан in vitro дээр суурилсан, харин мөөгөнцрийн хоёр эрлийз нь уураг, уургийн харилцан үйлчлэлийг шинжлэхэд зориулагдсан in vitro дээр суурилсан шинжилгээ юм. Тиймээс энэ нь мөөгөнцрийн нэг эрлийз ба мөөгөнцрийн хоёр эрлийз хоёрын гол ялгаа юм. Цаашилбал, мөөгөнцрийн нэг эрлийз, өгөөш нь ДНХ-ийн хэлтэрхий, олз нь уургийн молекул юм. Нөгөөтэйгүүр, хоёр эрлийз мөөгөнцрийн өгөөш, олз хоёулаа уургийн молекулууд юм.
Доорх инфографик нь мөөгөнцрийн нэг эрлийз болон мөөгөнцрийн хоёр эрлийз хоёрын ялгааг зэрэгцүүлэн харьцуулахын тулд хүснэгт хэлбэрээр жагсаасан болно.
Хураангуй – Мөөгөнцрийн нэг эрлийз ба мөөгөнцрийн хоёр эрлийз
Мөөгөнцрийн нэг эрлийз ба мөөгөнцрийн хоёр эрлийз нь in vitro дээр суурилсан хоёр чухал шинжилгээ юм. Мөөгөнцрийн нэг эрлийз нь ДНХ ба уургийн харилцан үйлчлэлийг шинжлэхэд зориулагдсан in vitro дээр суурилсан шинжилгээ бөгөөд мөөгөнцрийн хоёр эрлийз нь уураг, уургийн харилцан үйлчлэлийг шинжлэхэд зориулагдсан in vitro дээр суурилсан шинжилгээ юм. Тиймээс энэ нь мөөгөнцрийн нэг эрлийз ба мөөгөнцрийн хоёр эрлийз хоёрын гол ялгаа юм.
